د کباب د تخم پوډر او د هغې مرکباتو بیولوژیکي فعالیت د مچیو په وړاندې د چاپیریال دوستانه لاروا وژونکي په توګه

په مؤثره توګهد مچیو کنټرولاو د هغو ناروغیو پیښې کمې کړي چې دوی یې لیږدوي، د کیمیاوي آفت وژونکو لپاره ستراتیژیک، دوامداره او چاپیریال دوستانه بدیلونو ته اړتیا ده. موږ د ځینو براسیکاسی (کورنۍ براسیکا) څخه د تخم خواړه د نباتاتو څخه اخیستل شوي ایزوتیوسایانټونو سرچینې په توګه ارزولي چې د بیولوژیکي پلوه غیر فعال ګلوکوزینولاټونو انزیماتیک هایدرولیسس لخوا تولید شوي د مصري ایډز کنټرول لپاره کارول کیږي (L.، 1762). پنځه غوړ شوي تخم خواړه (براسیکا جونسا (L) سیزرن.، 1859، لیپیډیم سیټیوم ایل.، 1753، سیناپیس البا ایل.، 1753، تلاسپي اروینز ایل.، 1753 او تلاسپي اروینز - د تودوخې غیر فعالولو او انزایمیک تخریب درې اصلي ډولونه کیمیاوي محصولات د الییل ایزوتیوسایانټ، بینزیل ایزوتیوسایانټ او 4-هایډروکسیبینزیلیسوتیوسایانټ زهریت (LC50) د ایډز ایجپټي لاروا ته د 24 ساعتونو تماس کې ټاکلو لپاره = 0.04 g/120 ملی لیتر dH2O). د سرسونو، سپینو سرسونو او هارس ټیل لپاره د LC50 ارزښتونه. د تخم خواړه په ترتیب سره 0.05، 0.08 او 0.05 وو د الیل ایزوتیوسایانیټ (LC50 = 19.35 ppm) او 4 په پرتله. - هایدروکسایبینزایلیسوتیوسایانیټ (LC50 = 55.41 ppm) د درملنې وروسته د 24 ساعتونو په جریان کې د لاروا لپاره د 0.1 g/120 ml dH2O په پرتله ډیر زهرجن و. دا پایلې د الفالفا تخم خواړو تولید سره مطابقت لري. د بینزیل ایسټرونو لوړ موثریت د محاسبه شوي LC50 ارزښتونو سره مطابقت لري. د تخم خواړو کارول کولی شي د مچیو کنټرول لپاره مؤثره میتود چمتو کړي. د صلیبي تخم پوډر او د هغې اصلي کیمیاوي اجزاو اغیزمنتوب د مچیو لاروا په وړاندې او ښیې چې څنګه د صلیبي تخم پوډر کې طبیعي مرکبات کولی شي د مچیو کنټرول لپاره د امید لرونکي چاپیریال دوستانه لاروا وژونکي په توګه کار وکړي.
د ایډز مچیو له امله رامینځته شوي ویکتور څخه لیږدول شوي ناروغۍ لاهم د عامې روغتیا یوه لویه نړیواله ستونزه ده. د مچیو له امله رامینځته شوي ناروغیو پیښې په جغرافیایي ډول 1,2,3 خپریږي او بیا راپورته کیږي، چې د جدي ناروغیو خپریدو لامل کیږي 4,5,6,7. د انسانانو او څارویو ترمنځ د ناروغیو خپریدل (د مثال په توګه، چکنګونیا، ډینګي، ریفټ ویلی تبه، ژیړ تبه او زیکا ویروس) بې ساري دي. یوازې د ډینګي تبه شاوخوا 3.6 ملیارده خلک په استوایی سیمو کې د انتان خطر سره مخ کوي، چې اټکل کیږي 390 ملیون انتانات هر کال پیښیږي، چې په پایله کې یې په کال کې 6,100-24,300 مړینې کیږي. په سویلي امریکا کې د زیکا ویروس بیا راڅرګندیدل او خپریدو د اخته میرمنو څخه زیږیدلو ماشومانو کې د دماغ زیان له امله د نړۍ پام ځانته اړولی دی. کریمر او نور 3 وړاندوینه کوي چې د ایډز مچیو جغرافیایي لړۍ به پراخه شي او تر 2050 پورې به د نړۍ نیمایي نفوس د مچیو له امله رامینځته شوي اربو ویروسونو له امله د انتان خطر سره مخ وي.
د ډینګي او ژیړ تبې په وړاندې د وروستیو رامینځته شویو واکسینونو پرته، د ډیری مچیو څخه رامینځته شوي ناروغیو پروړاندې واکسینونه لا تر اوسه نه دي رامینځته شوي 9,10,11. واکسینونه لاهم په محدود مقدار کې شتون لري او یوازې په کلینیکي آزموینو کې کارول کیږي. د مصنوعي حشره وژونکو په کارولو سره د مچیو د ویکتورونو کنټرول د مچیو څخه رامینځته شوي ناروغیو د خپریدو کنټرول لپاره یوه کلیدي ستراتیژي وه 12,13. که څه هم مصنوعي آفت وژونکي د مچیو په وژلو کې مؤثر دي، د مصنوعي آفت وژونکو دوامداره کارول په غیر هدف لرونکي ژوندیو موجوداتو منفي اغیزه کوي او چاپیریال ککړوي 14,15,16. حتی ډیر خطرناک د کیمیاوي حشره وژونکو په وړاندې د مچیو د مقاومت زیاتوالي رجحان دی 17,18,19. د آفت وژونکو سره تړلې دې ستونزو د ناروغیو ویکتورونو کنټرول لپاره د اغیزمنو او چاپیریال دوستانه بدیلونو لټون ګړندی کړی دی.
د آفتونو د کنټرول لپاره د نباتاتو آفت وژونکو سرچینو په توګه مختلف نباتات رامینځته شوي دي 20,21. د نباتاتو مواد عموما د چاپیریال سره دوستانه دي ځکه چې دوی بایوډیګریډ وړ دي او د غیر هدف لرونکي ژوندیو موجوداتو لکه تی لرونکو، کبانو او امفیبیانو لپاره ټیټ یا نه منلو وړ زهرجنیت لري 20,22. د بوټو چمتووالی د مختلفو بایو فعال مرکباتو تولید لپاره پیژندل کیږي چې د عمل مختلف میکانیزمونه لري ترڅو د مچیو د ژوند مختلف پړاوونه په مؤثره توګه کنټرول کړي 23,24,25,26. د نباتاتو څخه اخیستل شوي مرکبات لکه اړین غوړي او نور فعال نباتاتي اجزا پاملرنه راجلب کړې او د مچیو د ویکتورونو کنټرول لپاره نوښتګر وسیلو ته لاره هواره کړې. اړین غوړي، مونوټرپینز او سیسکویټرپینز د مخنیوي، د تغذیه کولو مخنیوي او اوویسایډونو په توګه عمل کوي 27,28,29,30,31,32,33. ډیری د سبزیجاتو غوړي د مچیو لاروا، پوپا او لویانو د مړینې لامل کیږي 34,35,36، د حشراتو عصبي، تنفسي، انډروکرین او نورو مهم سیسټمونو باندې اغیزه کوي 37.
وروستیو څیړنو د سرې بوټو او د هغوی د تخمونو د بایو اکټیو مرکباتو د سرچینې په توګه د احتمالي کارونې په اړه بصیرت چمتو کړی دی. د سرې د تخم خواړه د بایو فومیګینټ په توګه ازمول شوي دي 38,39,40,41 او د زیان رسوونکو واښو د مخنیوي لپاره د خاورې د تعدیل په توګه کارول کیږي 42,43,44 او د خاورې څخه رامینځته شوي نباتاتو د ناروغیو کنټرول 45,46,47,48,49,50، د نباتاتو تغذیه. نیماتوډونه 41,51, 52, 53, 54 او آفتونه 55, 56, 57, 58, 59, 60. د دې تخم پوډر فنګسي وژونکي فعالیت د نباتاتو محافظتي مرکباتو ته منسوب دی چې isothiocyanates38,42,60 نومیږي. په نباتاتو کې، دا محافظتي مرکبات د نباتاتو په حجرو کې د غیر بایو اکټیو ګلوکوسینولایټونو په بڼه زیرمه کیږي. په هرصورت، کله چې نباتات د حشراتو د تغذیې یا د رنځجن انتان له امله زیانمن شي، ګلوکوزینولایټونه د مایروسیناز لخوا بایو اکټیو ایزوتیو سائینایټس55,61 ته هایدرولیز کیږي. ایزوتیوسایانیټس بې ثباته مرکبات دي چې د پراخ سپیکٹرم انټي مایکروبیل او حشره وژونکي فعالیت لپاره پیژندل کیږي، او د دوی جوړښت، بیولوژیکي فعالیت او محتوا د براسیسیسیای ډولونو کې په پراخه کچه توپیر لري 42,59,62,63.
که څه هم د سرې د تخم له ډوډۍ څخه ترلاسه شوي ایزوتیوساینټونه د حشراتو ضد فعالیت لپاره پیژندل شوي، د طبي پلوه مهم ارتروپوډ ویکتورونو په وړاندې د بیولوژیکي فعالیت په اړه معلومات شتون نلري. زموږ مطالعې د ایډیز مچیو په وړاندې د څلورو خراب شوي تخم پوډرونو لاروا ضد فعالیت معاینه کړ. د ایډیز ایجپټي لاروا. د مطالعې هدف د مچیو کنټرول لپاره د چاپیریال دوستانه بایوپیستیکونو په توګه د دوی احتمالي کارونې ارزونه وه. د تخم ډوډۍ درې لوی کیمیاوي اجزا، الیل ایزوتیوساینټ (AITC)، بینزیل ایزوتیوساینټ (BITC)، او 4-هایډروکسیبینزایلیسوتیوساینټ (4-HBITC) هم د مچیو لاروا په وړاندې د دې کیمیاوي اجزاو بیولوژیکي فعالیت ازموینې لپاره ازمول شوي. دا لومړی راپور دی چې د مچیو لاروا په وړاندې د څلورو کباب تخم پوډرونو او د دوی اصلي کیمیاوي اجزاو اغیزمنتوب ارزوي.
د ایډز ایجپټي (راکفیلر سټرین) لابراتوار کالونۍ په 26 درجو سانتي ګراد، 70٪ نسبي رطوبت (RH) او 10:14 ساعتونو (L:D فوتوپیریډ) کې ساتل شوې وې. جوړه شوې میرمنې په پلاستيکي پنجرو کې ځای پر ځای شوې وې (لوړوالی 11 سانتي متره او قطر 9.5 سانتي متره) او د بوتل تغذیه کولو سیسټم له لارې د سیټریټ شوي غوایانو وینې (هیمو سټیټ لابراتوارونو شرکت، ډیکسن، CA، USA) په کارولو سره تغذیه شوې. د وینې تغذیه د معمول په څیر د غشا څو شیشې فیډر (کیمګلاس، ژوند علوم LLC، وینلینډ، NJ، USA) په کارولو سره ترسره شوه چې د اوبو د حمام ټیوب (HAAKE S7، ترمو-ساینټیفیک، والټم، MA، USA) سره وصل وه چې د تودوخې کنټرول 37 °C دی. د هر شیشې فیډ چیمبر په ښکته برخه کې د پارافیلم M فلم وغځوئ (مساحت 154 mm2). بیا هر فیډر په پورتنۍ گرډ کې ځای پر ځای شو چې د ملګرتیا ښځینه لرونکي پنجره پوښي. د غواګانو وینه تقریبا ۳۵۰-۴۰۰ μl د پاستور پایپټ (فشربرانډ، فشر ساینسي، والټم، ایم اے، امریکا) په کارولو سره د شیشې فیډر فنل ته اضافه شوه او لویانو چینجيانو ته اجازه ورکړل شوه چې لږترلږه یو ساعت لپاره اوبه وباسي. بیا امیندواره میرمنو ته د ۱۰٪ سوکروز محلول ورکړل شو او اجازه ورکړل شوه چې په مرطوب فلټر کاغذ کې هګۍ واچوي چې په انفرادي الټرا-کلیر سوفل کپونو (۱.۲۵ فل اونس اندازه، ډارټ کانټینر کارپوریشن، میسن، ایم آی، امریکا) کې پوښل شوي وي. د اوبو سره پنجره. د هګیو لرونکي فلټر کاغذ په یوه مهر شوي کڅوړه (SC Johnsons، Racine، WI) کې ځای په ځای کړئ او په ۲۶ درجو سانتي ګراد کې یې وساتئ. هګۍ له هګیو څخه راووتل شوې او شاوخوا ۲۰۰-۲۵۰ لاروا په پلاستيکي ټریونو کې لوی شول چې د خرگوش چاو (ZuPreem، Premium Natural Products، Inc.، Mission، KS، امریکا) او د ځیګر پوډر (MP Biomedicals، LLC، Solon، OH، امریکا) مخلوط لري. او د کب فلیټ (TetraMin، Tetra GMPH، Meer، جرمني) د ۲:۱:۱ په تناسب کې. زموږ په بایو ازموینو کې د دریمې برخې لاروا کارول شوې وه.
په دې څیړنه کې کارول شوي د نباتاتو تخم مواد د لاندې سوداګریزو او دولتي سرچینو څخه ترلاسه شوي: براسیکا جونسیا (نسواري سرس - پیسفک سرو زرو) او براسیکا جونسیا (سپین سرس - ایدا سرو زرو) د پیسفک شمال لویدیځ بزګرانو کوپراتیف، واشنګټن ایالت، متحده ایالاتو څخه؛ (ګارډن کریس) د کیلي سیډ او هارډویر شرکت، پیوریا، IL، متحده ایالاتو څخه او تلاسپي اروینس (فیلډ پینی کریس - الیزابیت) د USDA-ARS، پیوریا، IL، متحده ایالاتو څخه؛ په څیړنه کې کارول شوي هیڅ تخم د آفت وژونکو سره درملنه نه ده شوې. ټول تخم مواد په دې څیړنه کې د محلي او ملي مقرراتو سره سم او د ټولو اړونده محلي ایالت او ملي مقرراتو سره سم پروسس او کارول شوي. دې څیړنې د ټرانسجینک نباتاتو ډولونه معاینه نه کړل.
د براسیکا جونسیا (PG)، الفالفا (Ls)، سپین سرې (IG)، تلاسپي اروینس (DFP) تخمونه د Retsch ZM200 الټراسنټرفیوګل مل (Retsch، هان، جرمني) په کارولو سره په ښه پوډر کې مینځل شوي وو چې د 0.75 ملي میتر میش او سټینلیس سټیل روټر، 12 غاښونو، 10,000 rpm (جدول 1) سره سمبال وو. د ځمکې د تخم پوډر د کاغذ تیمبل ته لیږدول شوی و او د 24 ساعتونو لپاره په سوکسلیټ اپریټس کې د هیکسین سره پاک شوی و. د خراب شوي ساحې سرې فرعي نمونه د 1 ساعت لپاره په 100 °C کې تودوخه درملنه شوې وه ترڅو مایروسیناز کم کړي او د ګلوکوزینولایټونو هایدرولیسس مخه ونیسي ترڅو بیولوژیکي فعال ایزوتیوسایانټونه جوړ کړي. د تودوخې درملنه شوي هارس ټیل تخم پوډر (DFP-HT) د مایروسیناز کم کړي او د منفي کنټرول په توګه وکارول شو.
د غوړ شوي تخم خواړو د ګلوکوسینولټ مینځپانګه د لوړ فعالیت مایع کروماتګرافي (HPLC) په کارولو سره د مخکینۍ خپرې شوې پروتوکول 64 سره سم په درې ګوني ډول ټاکل شوې وه. په لنډه توګه، د غوړ شوي تخم پوډر د 250 ملی ګرامه نمونې ته 3 ملی لیتر میتانول اضافه شو. هر نمونه د 30 دقیقو لپاره د اوبو په حمام کې سونیکیټ شوه او په تیاره کې د 23 درجو سانتي ګراد کې د 16 ساعتونو لپاره پریښودل شوه. د عضوي طبقې 1 ملی لیتر الکووټ بیا د 0.45 μm فلټر له لارې په اتوماتیک نمونې کې فلټر شو. د شیمازو HPLC سیسټم چلول (دوه LC 20AD پمپونه؛ SIL 20A اتوماتیک نمونې؛ DGU 20A ډیګاسر؛ د 237 nm څارنې لپاره SPD-20A UV-VIS کشف کونکی؛ او CBM-20A مخابراتي بس ماډل)، د تخم خواړو د ګلوکوسینولټ مینځپانګه په درې ګوني ډول ټاکل شوې وه. د شیمازو ایل سي حل سافټویر نسخه 1.25 (شیمازو کارپوریشن، کولمبیا، ایم ډي، امریکا) په کارولو سره. ستون د C18 انرتسیل ریورس فیز ستون و (250 ملي میتر × 4.6 ملي میتر؛ RP C-18، ODS-3، 5u؛ GL ساینسز، تورانس، CA، امریکا). د ګرځنده مرحلې لومړني شرایط په اوبو کې د 12٪ میتانول/88٪ 0.01 M ټیټرابوټیلامونیم هایدروکسایډ (TBAH؛ سیګما-الډریچ، سینټ لوئس، MO، امریکا) کې د 1 ملی لیتر/دقیقې جریان سره ټاکل شوي وو. د نمونې د 15 μl انجیکشن وروسته، لومړني شرایط د 20 دقیقو لپاره ساتل شوي، او بیا د محلول تناسب 100٪ میتانول ته تنظیم شوی، د نمونې تحلیل ټول وخت 65 دقیقې. د تازه چمتو شوي سیناپین، ګلوکوزینولایټ او مایروسین معیارونو (سیګما-الډریچ، سینټ لوئس، MO، USA) د سیریل ډیلیشنونو لخوا یو معیاري منحنی (nM/mAb پر بنسټ) رامینځته شو ترڅو د خراب شوي تخم خواړو سلفر مینځپانګه اټکل کړي. ګلوکوزینولایټونه. په نمونو کې د ګلوکوزینولایټ غلظت د Agilent 1100 HPLC (Agilent، Santa Clara، CA، USA) کې د OpenLAB CDS ChemStation نسخه (C.01.07 SR2 [255]) په کارولو سره ازمول شوي چې د ورته ستون سره سمبال شوي او د مخکې تشریح شوي میتود په کارولو سره. د ګلوکوزینولایټ غلظت ټاکل شوی و؛ د HPLC سیسټمونو ترمنځ د پرتلې وړ وي.
الیل ایزوتیوسایانټ (۹۴٪، مستحکم) او بینزیل ایزوتیوسایانټ (۹۸٪) د فشر ساینټیفیک (ترمو فشر ساینټیفیک، والټم، ایم اے، امریکا) څخه اخیستل شوي. ۴-هایډروکسایبینزایلیسوتیوسایانټ د کیمکروز (سانټا کروز بایو ټیکنالوژي، کالیفورنیا، امریکا) څخه اخیستل شوی. کله چې د مایروسیناز لخوا انزایماتیک هایدرولیز شي، نو ګلوکوزینولایټونه، ګلوکوزینولایټونه، او ګلوکوزینولایټونه په ترتیب سره الیل ایزوتیوسایانټ، بینزیل ایزوتیوسایانټ، او ۴-هایډروکسایبینزایلیسوتیوسایانټ جوړوي.
د لابراتوار بایو ازموینې د متوري او نورو 32 طریقې سره سم ترسره شوې. په څیړنه کې پنځه ټیټ غوړ لرونکي تخمونه کارول شوي: DFP، DFP-HT، IG، PG او Ls. شل لاروا په 400 ملی لیتره ضایع کیدونکي درې اړخیزه بیکر (VWR International, LLC, Radnor, PA, USA) کې ځای په ځای شوي وو چې 120 ملی لیتره ډیونیز شوي اوبه (dH2O) پکې شاملې وې. د مچیو لاروا زهرجنیت لپاره د تخم د خواړو اووه غلظتونه ازمول شوي: 0.01، 0.02، 0.04، 0.06، 0.08، 0.1 او 0.12 g د تخم خواړه/120 ملی لیتره dH2O د DFP تخم خواړه، DFP-HT، IG او PG لپاره. لومړني بایو ازموینې ښیي چې د Ls تخم غوړ شوی اوړه د څلورو نورو ازمول شوي تخم اوړو په پرتله ډیر زهرجن دی. له همدې امله، موږ د Ls تخم خواړو د درملنې اووه غلظتونه لاندې غلظتونو ته تنظیم کړل: 0.015، 0.025، 0.035، 0.045، 0.055، 0.065، او 0.075 g/120 mL dH2O.
د درملنې شرایطو لاندې د حشراتو د مړینې عادي ارزولو لپاره یو غیر درملنې شوي کنټرول ګروپ (dH20، د تخم خواړو ضمیمه نه) شامل شو. د هر تخم خواړو لپاره زهرجن بایو ازموینې کې درې نقل شوي درې-سلوپ بیکرونه (په هر بیکر کې 20 وروستي دریم انسټار لاروا) شامل وو، چې ټولټال 108 بوتلونه وو. درملنه شوي کانټینرونه د خونې په تودوخه (20-21 ° C) کې زیرمه شوي وو او د لاروا مړینه د درملنې غلظت ته د 24 او 72 ساعتونو دوامداره تماس په جریان کې ثبت شوې وه. که چیرې د مچیو بدن او ضمیمې د پتلي سټینلیس سټیل سپاتولا سره سوري یا لمس کولو پرمهال حرکت ونه کړي، د مچیو لاروا مړه ګڼل کیږي. مړه لاروا معمولا د کانټینر په ښکته یا د اوبو په سطحه کې د شا یا وینټرل موقعیت کې بې حرکته پاتې کیږي. تجربه په مختلفو ورځو کې د لاروا د مختلفو ډلو په کارولو سره درې ځله تکرار شوه، د لاروا د هر درملنې غلظت سره مخ شوي ټولټال 180 لاروا لپاره.
د مچیو لاروا ته د AITC، BITC، او 4-HBITC زهریت د ورته بایوسای پروسې په کارولو سره ارزول شوی مګر د مختلفو درملنې سره. د هر کیمیاوي لپاره د 100,000 ppm سټاک محلولونه چمتو کړئ د 100 µL کیمیاوي موادو سره د 900 µL مطلق ایتانول ته په 2-mL سینټرفیوج ټیوب کې اضافه کړئ او د 30 ثانیو لپاره یې وخورئ ترڅو په بشپړه توګه مخلوط شي. د درملنې غلظت زموږ د لومړني بایوسای پراساس ټاکل شوی و، کوم چې BITC د AITC او 4-HBITC په پرتله خورا ډیر زهرجن وموندل. د زهریت ټاکلو لپاره، د BITC 5 غلظتونه (1، 3، 6، 9 او 12 ppm)، د AITC 7 غلظتونه (5، 10، 15، 20، 25، 30 او 35 ppm) او د 4-HBITC 6 غلظتونه (15، 15، 20، 25، 30 او 35 ppm). (۳۰، ۴۵، ۶۰، ۷۵ او ۹۰ ppm). د کنټرول درملنه د ۱۰۸ μL مطلق ایتانول سره انجیکشن شوه، کوم چې د کیمیاوي درملنې اعظمي حجم سره مساوي دی. بایو ازموینې د پورته په څیر تکرار شوې، چې د درملنې په هر غلظت کې ټولټال ۱۸۰ لاروا ښکاره شول. د ۲۴ ساعتونو دوامداره تماس وروسته د AITC، BITC، او ۴-HBITC د هر غلظت لپاره د لاروا مړینه ثبت شوه.
د 65 خوراک پورې اړوند د مړینې معلوماتو پروبیټ تحلیل د پولو سافټویر (پولو پلس، لیورا سافټویر، نسخه 1.0) په کارولو سره ترسره شو ترڅو د 50٪ وژونکي غلظت (LC50)، 90٪ وژونکي غلظت (LC90)، سلپ، وژونکي خوراک کوفیشینټ، او 95٪ وژونکي غلظت محاسبه کړي. د لاګ-بدل شوي غلظت او د خوراک-مړینې منحني لپاره د وژونکي خوراک تناسب لپاره د باور وقفو پراساس. د مړینې معلومات د 180 لاروا د ګډ نقل معلوماتو پراساس دي چې د هر درملنې غلظت ته ښکاره شوي. احتمالي تحلیلونه د هر تخم خواړو او هر کیمیاوي برخې لپاره په جلا توګه ترسره شوي. د وژونکي خوراک تناسب د 95٪ باور وقفې پراساس، د تخم خواړو او کیمیاوي اجزاو زهرجنیت د مچیو لاروا ته د پام وړ توپیر ګڼل کیده، نو د باور وقفه چې د 1 ارزښت لري د پام وړ توپیر نه درلود، P = 0.0566.
د تخمونو په خرابو غوړو اوړو کې د لویو ګلوکوزینولایټونو د ټاکلو لپاره د HPLC پایلې په جدول 1 کې لیست شوي دي. د تخمونو په ازمول شوي اوړو کې لوی ګلوکوزینولایټونه د DFP او PG پرته توپیر درلود، چې دواړه یې مایروسیناز ګلوکوسینولایټونه لري. په PG کې د مایروسینین مینځپانګه د DFP په پرتله لوړه وه، په ترتیب سره 33.3 ± 1.5 او 26.5 ± 0.9 mg/g. د Ls تخم پوډر 36.6 ± 1.2 mg/g ګلوکوګلایکون لري، پداسې حال کې چې د IG تخم پوډر 38.0 ± 0.5 mg/g سیناپین لري.
د Ae. Aedes aegypti مچیو لاروا هغه وخت ووژل شول کله چې د تخم د غوړو د له منځه وړلو سره درملنه وشوه، که څه هم د درملنې اغیزمنتوب د نباتاتو ډولونو پورې اړه لري. یوازې DFP-NT د 24 او 72 ساعتونو د تماس وروسته د مچیو لاروا لپاره زهرجن نه و (جدول 2). د فعال تخم پوډر زهریت د زیاتیدونکي غلظت سره زیات شو (شکل 1A، B). د تخم د غوښې زهریت د مچیو لاروا ته د 24 ساعتونو او 72 ساعتونو ارزونو کې د LC50 ارزښتونو د وژونکي خوراک تناسب 95٪ CI پراساس د پام وړ توپیر درلود (جدول 3). د 24 ساعتونو وروسته، د Ls تخم د خوړو زهرجن اغیز د نورو تخم د خوړو درملنې په پرتله ډیر و، د لاروا لپاره ترټولو لوړ فعالیت او اعظمي زهریت سره (LC50 = 0.04 g/120 ml dH2O). لاروا د IG، Ls او PG د تخم پوډر درملنې په پرتله په 24 ساعتونو کې د DFP په وړاندې لږ حساس وو، د LC50 ارزښتونه په ترتیب سره 0.115، 0.04 او 0.08 g/120 ml dH2O وو، کوم چې په احصایوي ډول د LC50 ارزښت څخه لوړ وو. 0.211 g/120 ml dH2O (جدول 3). د DFP، IG، PG او Ls LC90 ارزښتونه په ترتیب سره 0.376، 0.275، 0.137 او 0.074 g/120 ml dH2O وو (جدول 2). د DPP ترټولو لوړ غلظت 0.12 g/120 ml dH2O و. د 24 ساعتونو ارزونې وروسته، د لاروا اوسط مړینه یوازې 12٪ وه، پداسې حال کې چې د IG او PG لاروا اوسط مړینه په ترتیب سره 51٪ او 82٪ ته ورسیده. د ۲۴ ساعتونو ارزونې وروسته، د Ls تخم خواړو درملنې (0.075 g/120 ml dH2O) ترټولو لوړ غلظت لپاره د لاروا اوسط مړینه ۹۹٪ وه (شکل ۱A).
د مړینې منحني د Ae. مصري لاروا (دریم انسټار لاروا) د خوراک غبرګون (Probit) څخه د تخم خواړو غلظت ته د درملنې وروسته 24 ساعته (A) او 72 ساعته (B) اټکل شوي. نقطه شوې کرښه د تخم خواړو درملنې LC50 استازیتوب کوي. DFP Thlaspi arvense، DFP-HT حرارت غیر فعال Thlaspi arvense، IG Sinapsis alba (Ida Gold)، PG Brassica juncea (Pacific Gold)، Ls Lepidium sativum.
د ۷۲ ساعتونو په ارزونه کې، د DFP، IG او PG تخم خواړو LC50 ارزښتونه په ترتیب سره 0.111، 0.085 او 0.051 g/120 ml dH2O وو. نږدې ټول لاروا چې د Ls تخم خواړو سره مخ شوي وو د ۷۲ ساعتونو سره مخ کیدو وروسته مړه شول، نو د مړینې معلومات د پروبیټ تحلیل سره متناسب وو. د نورو تخم خواړو په پرتله، لاروا د DFP تخم خواړو درملنې ته لږ حساس وو او د احصایوي پلوه لوړ LC50 ارزښتونه یې درلودل (جدولونه ۲ او ۳). د ۷۲ ساعتونو وروسته، د DFP، IG او PG تخم خواړو درملنې لپاره د LC50 ارزښتونه په ترتیب سره 0.111، 0.085 او 0.05 g/120 ml dH2O اټکل شوي. د ۷۲ ساعتونو ارزونې وروسته، د DFP، IG او PG تخم پوډرونو LC90 ارزښتونه په ترتیب سره 0.215، 0.254 او 0.138 g/120 ml dH2O وو. د ۷۲ ساعتونو ارزونې وروسته، د 0.12 g/120 ml dH2O اعظمي غلظت کې د DFP، IG او PG تخم خواړو درملنې لپاره د لاروا اوسط مړینه په ترتیب سره 58٪، 66٪ او 96٪ وه (انځور ۱ ب). د ۷۲ ساعتونو ارزونې وروسته، د PG تخم خواړو د IG او DFP تخم خواړو په پرتله ډیر زهرجن وموندل شو.
مصنوعي ایزوتیوسیانیټ، ایلیل ایزوتیوسیانیټ (AITC)، بینزیل ایزوتیوسیانیټ (BITC) او 4-هایډروکسیبینزایلیسوتیوسیانیټ (4-HBITC) کولی شي په مؤثره توګه د مچیو لاروا ووژني. د درملنې وروسته په 24 ساعتونو کې، BITC د لاروا لپاره ډیر زهرجن و چې د LC50 ارزښت یې 5.29 ppm و چې د AITC لپاره 19.35 ppm او د 4-HBITC لپاره 55.41 ppm و (جدول 4). د AITC او BITC په پرتله، 4-HBITC ټیټ زهرجن او لوړ LC50 ارزښت لري. په خورا قوي تخم خواړو کې د دوو لوی ایزوتیوسیانیټ (Ls او PG) د مچیو لاروا زهرجنیت کې د پام وړ توپیرونه شتون لري. د AITC، BITC، او 4-HBITC ترمنځ د LC50 ارزښتونو د وژونکي خوراک تناسب پر بنسټ زهرجنیت یو احصایوي توپیر وښود چې د LC50 وژونکي خوراک تناسب 95٪ CI د 1 ارزښت نه درلود (P = 0.05، جدول 4). د BITC او AITC دواړو لوړ غلظت اټکل شوی و چې د ازمول شوي لاروا 100٪ ووژني (شکل 2).
د مړینې منحني د Ae د خوراک غبرګون (Probit) څخه اټکل شوي. د درملنې څخه 24 ساعته وروسته، مصري لاروا (دریم انسټار لاروا) مصنوعي ایزوتیوسایانیټ غلظت ته ورسید. نقطه شوې کرښه د ایزوتیوسایانیټ درملنې لپاره LC50 استازیتوب کوي. بینزیل ایزوتیوسایانیټ BITC، ایلیل ایزوتیوسایانیټ AITC او 4-HBITC.
د نباتاتو د بایو افت وژونکو کارول د مچیو د کنټرول اجنټانو په توګه له ډیرې مودې راهیسې مطالعه شوي دي. ډیری نباتات طبیعي کیمیاوي توکي تولیدوي چې د حشراتو ضد فعالیت لري 37. د دوی بایو فعال مرکبات د مصنوعي حشراتو ضد درملو لپاره یو زړه راښکونکی بدیل چمتو کوي چې د آفتونو په کنټرول کې لوی ظرفیت لري، په شمول د مچیو.
د سرې بوټي د خپلو تخمونو لپاره د فصل په توګه کرل کیږي، د مصالحې او د تیلو سرچینې په توګه کارول کیږي. کله چې د سرې غوړ له تخمونو څخه استخراج کیږي یا کله چې د سرې غوړ د بایو سونګ توکو په توګه کارول کیږي، 69 فرعي محصول د تخم غوړ له منځه وړل کیږي. دا د تخم ډوډۍ خپل ډیری طبیعي بایو کیمیکل اجزا او هایدرولیټیک انزایمونه ساتي. د دې تخم ډوډۍ زهریت د ایزوتیوسایانیټس 55,60,61 تولید ته منسوب دی. ایزوتیوسایانیټس د تخم ډوډۍ د هایدریشن په جریان کې د انزایم مایروسیناز لخوا د ګلوکوسینولایټونو د هایدرولیسس لخوا رامینځته کیږي 38,55,70 او د فنګس وژونکي، باکتریا وژونکي، نیماتیک وژونکي او حشراتو وژونکي اغیزې لري، او همدارنګه د کیمیاوي حسي اغیزو او کیموتراپیوټیک ملکیتونو په شمول نور ملکیتونه 61,62,70. ډیری مطالعاتو ښودلې چې د سرې بوټي او د تخم ډوډۍ د خاورې او ذخیره شوي خواړو آفتونو په وړاندې د فومیګینټ په توګه په مؤثره توګه عمل کوي 57,59,71,72. په دې څیړنه کې، موږ د څلورو تخم لرونکو خواړو او د هغې د دریو بایو فعال محصولاتو AITC، BITC، او 4-HBITC زهریت د ایډیز مچیو لاروا ته ارزولی دی. ایډیز ایجیپټي. د تخم لرونکو خواړو مستقیم د مچیو لاروا لرونکي اوبو ته اضافه کول تمه کیږي چې د انزایمیک پروسې فعالې کړي چې ایزوتیوسایانیټونه تولیدوي چې د مچیو لاروا لپاره زهرجن دي. دا بایوټرانسفارمیشن په جزوي ډول د تخم لرونکو خواړو د لاروا وژونکي فعالیت او د حشراتو وژونکي فعالیت له لاسه ورکولو لخوا ښودل شوی کله چې د سرې تخم لرونکو خواړو د کارولو دمخه تودوخه درملنه وشوه. تمه کیږي چې د تودوخې درملنه به هایدرولیټیک انزایمونه له مینځه یوسي چې ګلوکوسینولایټونه فعالوي، په دې توګه د بایو فعال ایزوتیوسایانیټونو د رامینځته کیدو مخه نیسي. دا لومړۍ څیړنه ده چې په آبي چاپیریال کې د مچیو په وړاندې د کبابو د تخمونو پوډر د حشراتو وژونکي ملکیتونه تاییدوي.
د ازمول شویو تخمونو پوډرونو په منځ کې، د واټرکریس تخم پوډر (Ls) تر ټولو زهرجن و، چې د Aedes albopictus د مړینې لوړه کچه یې رامینځته کړه. د Aedes aegypti لاروا په دوامداره توګه د 24 ساعتونو لپاره پروسس شوي. پاتې درې تخم پوډر (PG، IG او DFP) ورو فعالیت درلود او بیا هم د 72 ساعتونو دوامداره درملنې وروسته د پام وړ مړینې لامل شو. یوازې Ls تخم خواړه د ګلوکوزینولایټونو د پام وړ مقدار درلود، پداسې حال کې چې PG او DFP مایروسینازی او IG د لوی ګلوکوزینولایټ په توګه ګلوکوزینولایټ درلود (جدول 1). ګلوکوټروپیولین BITC ته هایډرولیز شوی او سینالبین 4-HBITC61,62 ته هایډرولیز شوی. زموږ د بایو ازموینې پایلې ښیې چې د Ls تخم خواړه او مصنوعي BITC دواړه د مچیو لاروا لپاره خورا زهرجن دي. د PG او DFP تخم خواړو اصلي برخه مایروسینازی ګلوکوسینولایټ ده، کوم چې AITC ته هایډرولیز شوی. AITC د 19.35 ppm د LC50 ارزښت سره د مچیو لاروا په وژلو کې مؤثر دی. د AITC او BITC په پرتله، 4-HBITC isothiocyanate د لاروا لپاره تر ټولو لږ زهرجن دی. که څه هم AITC د BITC په پرتله لږ زهرجن دی، د دوی LC50 ارزښتونه د مچیو لاروا باندې ازمول شوي ډیری اړینو تیلو څخه ټیټ دي 32,73,74,75.
زموږ د کروسیفیرس تخم پوډر چې د مچیو لاروا په وړاندې کارول کیږي یو لوی ګلوکوزینولایټ لري، چې د HPLC لخوا ټاکل شوي د ټولو ګلوکوزینولایټونو 98-99٪ څخه ډیر جوړوي. د نورو ګلوکوزینولایټونو اندازه معلومه شوه، مګر د دوی کچه د ټولو ګلوکوزینولایټونو 0.3٪ څخه کمه وه. د واټرکریس (L. sativum) د تخم پوډر ثانوي ګلوکوزینولایټونه (سینیګرین) لري، مګر د دوی تناسب د ټولو ګلوکوزینولایټونو 1٪ دی، او د دوی مینځپانګه لاهم مهمه نه ده (شاوخوا 0.4 mg/g د تخم پوډر). که څه هم PG او DFP ورته اصلي ګلوکوزینولایټ (myrosin) لري، د دوی د تخم خواړو لاروا وژونکي فعالیت د دوی د LC50 ارزښتونو له امله د پام وړ توپیر لري. د پوډري ملډو سره زهرجنیت توپیر لري. د Aedes aegypti لاروا راڅرګندیدل ممکن د مایروسینیز فعالیت یا د دوو تخمونو د تغذیې ترمنځ ثبات کې د توپیر له امله وي. د مایروسیناز فعالیت د هایدرولیسز محصولاتو لکه ایزوتیوساینټس په بایو شتون کې مهم رول لوبوي په براسیسیکاسی نباتاتو کې 76. د پوکاک او نورو لخوا پخوانیو راپورونو 77 او ویلکینسن او نورو لخوا ښودل شوي چې د مایروسیناز فعالیت او ثبات کې بدلونونه ممکن د جینیاتي او چاپیریالي عواملو سره هم تړاو ولري.
د تخم د خواړو د LC50 ارزښتونو پر بنسټ د اټکل شوي بایو اکټیو ایزوتیوسایانیټ مینځپانګه د 24 او 72 ساعتونو (جدول 5) کې د اړوندو کیمیاوي غوښتنلیکونو سره پرتله کولو لپاره محاسبه شوه. د 24 ساعتونو وروسته، د تخم په خواړو کې ایزوتیوسایانیټ د خالص مرکباتو په پرتله ډیر زهرجن وو. د LC50 ارزښتونه د ایزوتیوسایانیټ تخم درملنې د هر ملیون (ppm) برخو پر بنسټ محاسبه شوي د BITC، AITC، او 4-HBITC غوښتنلیکونو لپاره د LC50 ارزښتونو څخه ټیټ وو. موږ ولیدل چې لاروا د تخم د خواړو ګولۍ مصرفوي (شکل 3A). په پایله کې، لاروا ممکن د تخم د خواړو ګولۍ خوړلو سره د زهرجن ایزوتیوسایانیټ سره ډیر متمرکز تماس ترلاسه کړي. دا د 24 ساعتونو په تماس کې د IG او PG تخم خواړو درملنې کې خورا څرګند و، چیرې چې د LC50 غلظت په ترتیب سره د خالص AITC او 4-HBITC درملنې په پرتله 75٪ او 72٪ ټیټ و. د Ls او DFP درملنې د خالص ایزوتیوساینټ په پرتله ډیرې زهرجنې وې، چې د LC50 ارزښتونه یې په ترتیب سره 24٪ او 41٪ ټیټ وو. د کنټرول درملنې کې لاروا په بریالیتوب سره پوپټ شو (انځور 3B)، پداسې حال کې چې د تخم خواړو درملنې کې ډیری لاروا پوپټ نه شو او د لاروا وده د پام وړ ځنډیدلې وه (انځور 3B،D). په سپوډوپټرالیټورا کې، ایزوتیوساینټ د ودې ځنډ او پراختیایي ځنډ سره تړاو لري79.
د Ae. Aedes aegypti مچیو لاروا په دوامداره توګه د 24-72 ساعتونو لپاره د براسیکا تخم پوډر سره مخ شوي وو. (A) مړه لاروا چې د خولې په برخو کې د تخم خواړو ذرات لري (دایره شوي)؛ (B) د کنټرول درملنه (dH20 پرته له اضافه شوي تخم خواړو) ښیې چې لاروا په نورمال ډول وده کوي او د 72 ساعتونو وروسته د پوپټ پیل کوي (C، D) لاروا د تخم خواړو سره درملنه شوې؛ د تخم خواړو په وده کې توپیرونه ښودلي او پوپټ نه کوي.
موږ د مچیو لاروا باندې د ایزوتیوسایانټس د زهرجن اغیزو میکانیزم نه دی مطالعه کړی. په هرصورت، د سره اور وژونکي میږیانو (سولینوپسس انویکټا) په اړه پخوانیو مطالعاتو ښودلې چې د ګلوټاتیون S-ټرانسفریز (GST) او ایسټریز (EST) مخنیوی د ایزوتیوسایانیټ بایو فعالیت اصلي میکانیزم دی، او AITC، حتی په ټیټ فعالیت کې، کولی شي د GST فعالیت هم منع کړي. په ټیټ غلظت کې سره وارد شوي اور وژونکي میږیان. خوراک 0.5 µg/ml80 دی. برعکس، AITC د بالغ جوارو ویویلز (Sitophilus zeamais)81 کې اسیتیلچولینسټریز منع کوي. ورته مطالعات باید د مچیو لاروا کې د ایزوتیوسایانیټ فعالیت میکانیزم روښانه کولو لپاره ترسره شي.
موږ د تودوخې غیر فعال DFP درملنې څخه کار اخلو ترڅو د دې وړاندیز ملاتړ وکړو چې د نبات ګلوکوزینولاټونو هایدرولیسس د غبرګون لرونکي ایزوتیوساینټس جوړولو لپاره د سرې د تخم د خواړو لخوا د مچیو لاروا کنټرول لپاره د میکانیزم په توګه کار کوي. د DFP-HT تخم خواړه د ازمول شوي غوښتنلیک نرخونو کې زهرجن نه و. لافارګا او نور. 82 راپور ورکړ چې ګلوکوزینولاټونه په لوړه تودوخه کې د تخریب سره حساس دي. د تودوخې درملنه هم تمه کیږي چې د تخم خواړو کې د مایروسینولاټونو هایدرولیسس کم کړي او د ګلوکوزینولاټونو هایدرولیسس مخه ونیسي ترڅو د تعامل لرونکي ایزوتیوساینټس جوړ کړي. دا د اوکوناډ او نور لخوا هم تایید شو. 75 ښودلې چې مایروسینولاټونه د تودوخې حساس دي، دا ښیې چې د مایروسینولاټونه فعالیت په بشپړ ډول غیر فعال شوی و کله چې سرې، تور سرې، او د وینې ریښې تخمونه د 80 درجو څخه پورته تودوخې سره مخ شوي وو. C. دا میکانیزمونه ممکن د تودوخې درملنې شوي DFP تخم خواړو د حشراتو وژونکي فعالیت له لاسه ورکولو پایله ولري.
په دې توګه، د سرې د تخم خواړه او د هغې درې لوی ایزوتیوساینټونه د مچیو لاروا لپاره زهرجن دي. د تخم خواړو او کیمیاوي درملنې ترمنځ د دې توپیرونو په پام کې نیولو سره، د تخم خواړو کارول ممکن د مچیو کنټرول لپاره یو اغیزمن میتود وي. د تخم پوډر کارولو اغیزمنتوب او ثبات ښه کولو لپاره د مناسبو فورمولونو او اغیزمنو تحویلي سیسټمونو پیژندلو ته اړتیا ده. زموږ پایلې د مصنوعي آفت وژونکو بدیل په توګه د سرې د تخم خواړو احتمالي کارول په ګوته کوي. دا ټیکنالوژي کولی شي د مچیو ویکتورونو کنټرول لپاره یو نوښتګر وسیله شي. ځکه چې د مچیو لاروا په آبي چاپیریال کې وده کوي او د تخم خواړو ګلوکوزینولایټونه په انزایمیک ډول د هایډریشن وروسته فعال ایزوتیوساینایټونو ته بدلیږي، د مچیو اخته اوبو کې د سرې د تخم خواړو کارول د کنټرول د پام وړ ظرفیت وړاندې کوي. که څه هم د ایزوتیوساینایټس لاروا وژونکي فعالیت توپیر لري (BITC > AITC > 4-HBITC)، د دې لپاره چې معلومه شي چې ایا د تخم خواړو سره د ډیری ګلوکوزینولایټونو سره یوځای کول په همغږۍ سره زهرجنیت زیاتوي، ډیرې څیړنې ته اړتیا ده. دا لومړۍ څیړنه ده چې د غوړ شوي صلیبي تخم خواړو او دریو بایو فعال ایزوتیوساینایټس حشره وژونکو اغیزو ښودنه کوي چې په مچیو باندې. د دې څېړنې پایلې د دې ښودنه کوي چې د کباب د تخم غوړ شوی خواړه، چې د تخمونو څخه د تیلو استخراج یو فرعي محصول دی، ممکن د مچیو د کنټرول لپاره د یو ژمن لاروا وژونکي اجنټ په توګه کار وکړي. دا معلومات کولی شي د نباتاتو د بایو کنټرول اجنټانو کشف او د ارزانه، عملي او چاپیریال دوستانه بایو آفت وژونکو په توګه د دوی پراختیا کې مرسته وکړي.
د دې مطالعې لپاره تولید شوي ډیټاسیټونه او پایله لرونکي تحلیلونه د اړونده لیکوال څخه د مناسب غوښتنې په صورت کې شتون لري. د مطالعې په پای کې، ټول هغه مواد چې په څیړنه کې کارول شوي (حشرات او د تخم خواړه) له منځه یوړل شول.