د فنګس وژونکو ضمیمه د خالص انرژی لاسته راوړنه او د مایکروبیوم تنوع په یوازیتوب میسن مچیو کې کموي.

د Nature.com لیدلو لپاره مننه.د براوزر نسخه چې تاسو یې کاروئ محدود CSS ملاتړ لري.د غوره پایلو لپاره، موږ وړاندیز کوو چې تاسو د خپل براوزر نوې نسخه وکاروئ (یا په انټرنیټ اکسپلورر کې د مطابقت حالت غیر فعال کړئ).په ورته وخت کې، د روان ملاتړ ډاډ ترلاسه کولو لپاره، موږ سایټ پرته له سټایل یا جاواسکریپټ څخه ښکاره کوو.
فنګس وژونکي اکثرا د ونې د میوو د ګل کولو په وخت کې کارول کیږي او کولی شي د حشراتو ګرده کونکي ګواښ کړي.په هرصورت، په دې اړه لږ څه پیژندل شوي چې څنګه د مچیو غیر ګردي کونکي (د بیلګې په توګه، یوازینۍ مچۍ، Osmia cornifrons) د تماس او سیسټمیک فنګس وژونکو ته ځواب ووایی چې معمولا په مڼو کې د ګل کولو په وخت کې کارول کیږي.د پوهې دا تشه تنظیماتي پریکړې محدودوي چې خوندي غلظت او د فنګس وژونکو سپری کولو وخت ټاکي.موږ د دوه تماس فنګسي وژونکو (کیپتان او مانکوزیب) او څلور انټر لییر/فیتوسیسټم فنګسي وژونکو اغیزې ارزولې (ciprocycline، myclobutanil، pyrostrobin او trifloxystrobin).د لاروا د وزن زیاتوالی، بقا، د جنسیت تناسب او د بکتیریا تنوع باندې اغیزې.ارزونه د اوږدمهاله شفاهي بایوسای په کارولو سره ترسره شوې چې پکې ګرده په دریو دوزونو کې درملنه شوې وه چې اوس مهال د ساحې کارولو لپاره وړاندیز شوي دوز (1X)، نیم دوز (0.5X) او ټیټ دوز (0.1X).د مینکوزیب او پیریټیسولین ټول خوراکونه د پام وړ د بدن وزن او د لاروا بقا کموي.بیا موږ د 16S جین ترتیب کړ ترڅو د مینکوزیب لاروا باکتریوم مشخص کړي، هغه فنګس وژونکي چې د مړینې ترټولو لوی مسؤلیت لري.موږ وموندله چې د باکتریا تنوع او کثرت په لاروا کې چې د مینکوزیب درملنه شوي ګرده کې تغذیه شوي د پام وړ کم شوي.زموږ د لابراتوار پایلې ښیي چې د ګل کولو پرمهال د دې فنګسي وژونکو څخه ځینې سپری کول په ځانګړي ډول د O. cornifrons روغتیا ته زیان رسوي.دا معلومات د میوو د ونې محافظت محصولاتو دوامداره کارونې په اړه د راتلونکي مدیریت پریکړو لپاره اړین دي او د تنظیمي پروسو اساس په توګه کار کوي چې هدف یې د ګرده ګیرو ساتنه ده.
یوازینۍ میسن مچۍ اوسمیا کارنیفرون (Hymenoptera: Megachilidae) د 1970 لسیزې په وروستیو او د 1980 لسیزې په لومړیو کې د جاپان څخه متحده ایالاتو ته معرفي شوه، او نوعې له هغه وخت راهیسې په منظم ایکوسیستم کې مهم ګرده رول لوبولی دی.د دې مچیو طبیعي نفوس د ځنګلي مچیو د شاوخوا 50 ډولونو برخه ده چې هغه مچۍ بشپړوي چې په متحده ایالاتو کې د بادامو او مڼو باغونه ګرده کوي 2,3.د میسن مچۍ له ډیرو ننګونو سره مخ دي، په شمول د استوګنې ټوټې کول، رنځجن، او آفت وژونکي 3,4.د حشره وژونکو په منځ کې، فنګس وژونکي د انرژی لاسته راوړنې کموي، 5 او د بدن کنډیشن 6,7.که څه هم وروستي څیړنې وړاندیز کوي چې د میسن مچیو روغتیا په مستقیم ډول د کمنسل او اکټوباټیک مایکرو ارګانیزمونو لخوا اغیزمن کیږي، 8,9 ځکه چې باکتریا او فنګسي کولی شي په تغذیه او معافیت غبرګون اغیزه وکړي، د میسن مچیو په مایکروبیل تنوع باندې د فنګس وژونکو افشا کولو اغیزې یوازې پیل کیږي. مطالعه کړې.
د مختلفو اغیزو فنګس وژونکي (د تماس او سیسټمیک) په باغونو کې د ګل کولو دمخه او د ګل کولو په وخت کې سپرې کیږي ترڅو د ناروغیو درملنه وکړي لکه د مڼو سکاب، تریخ رټ، نسواري رټ او پوډري فایبر 10,11.فنګس وژونکي د ګرده ګیرو لپاره بې ضرر ګڼل کیږي، نو د ګل کولو دوره کې باغبانانو ته سپارښتنه کیږي؛د مچیو لخوا د دې فنګسایډونو افشا کول او خوړل نسبتا ښه پیژندل شوي، ځکه چې دا د متحده ایاالتو د چاپیریال ساتنې ادارې او ډیری نورو ملي تنظیم کونکو ادارو لخوا د آفت وژونکو د ثبت پروسې برخه ده 12,13,14.په هرصورت، په غیر مچیو باندې د فنګس وژونکو اغیزې لږ پیژندل شوي ځکه چې دوی په متحده ایالاتو کې د بازار موندنې د اجازې تړونونو لاندې اړین ندي 15.برسېره پردې، په عمومي توګه د واحد مچیو د ازموینې لپاره هیڅ معیاري پروتوکول شتون نلري 16,17، او د کالونیو ساتل چې د ازموینې لپاره مچۍ چمتو کوي 18 ننګونې دي.په ځنګلي مچیو باندې د آفت وژونکو اغیزو د مطالعې لپاره په اروپا او متحده ایالاتو کې د مختلف مدیریت شوي مچیو آزموینې په زیاتیدونکي توګه ترسره کیږي، او په دې وروستیو کې د O. cornifrons19 لپاره معیاري پروتوکولونه رامینځته شوي.
سینګ شوي مچۍ مونوسایټ دي او په سوداګریزه توګه د شاتو مچیو لپاره د تکمیل یا بدیل په توګه د کارپ په فصلونو کې کارول کیږي.دا مچۍ د مارچ او اپریل په منځ کې راڅرګندیږي، د نرانو څخه د ښځو څخه درې یا څلور ورځې مخکې راڅرګندیږي.د ملن کولو وروسته، ښځه په فعاله توګه ګرده او امرت راټولوي ترڅو د ټیوبلر غار (طبیعي یا مصنوعي) 1,20 کې د تخم حجرو لړۍ چمتو کړي.هګۍ د حجرو دننه په ګرده کې ایښودل کیږي؛ښځه بیا د راتلونکي حجرې چمتو کولو دمخه د خټو دیوال جوړوي.لومړی انسټار لاروا په کورین کې تړل شوي او په جنیني مایعاتو تغذیه کوي.له دوهم څخه تر پنځم انستار (پریپوپا)، لاروا په ګرده کې تغذیه کوي.کله چې د ګرده اکمالات په بشپړه توګه له منځه لاړ شي، لاروا د کوکوون، پوپټ جوړوي او د بالغانو په توګه په ورته برډ چیمبر کې راڅرګندیږي، معمولا د اوړي په وروستیو کې 20,23.لویان په راتلونکي پسرلي کې راڅرګندیږي.د لویانو بقا د خالص انرژی لاسته راوړلو (وزن زیاتوالی) سره د خواړو د مصرف پراساس تړاو لري.په دې توګه، د ګرده تغذیه کیفیت، او همدارنګه نور عوامل لکه هوا یا د آفت وژونکو سره مخ کیدل، د ژوندي پاتې کیدو او روغتیا ټاکونکي دي.
حشره وژونکي او فنګسي وژونکي د ګل کولو څخه مخکې کارول کیږي د نبات vasculature کې مختلف درجو ته حرکت کولی شي، د ټرانسلامینار څخه (د بیلګې په توګه، د پاڼو له پورتنۍ سطحې څخه ښکته سطح ته حرکت کولی شي، لکه ځینې فنګسي وژونکي) 25 په ریښتیا سیسټمیک اغیزو پورې.، کوم چې کولی شي د ریښو څخه تاج ته ننوځي ، کولی شي د مڼو ګلونو امرت ته ننوځي ، چیرې چې دوی کولی شي بالغ O. cornifrons 27 وژني.ځینې ​​آفت وژونکي هم ګرده ته ننوځي، چې د جوارو لاروا په وده اغیزه کوي او د دوی د مړینې لامل کیږي.نورو څیړنو ښودلې چې ځینې فنګس وژونکي کولی شي د اړوندو نوعو O. lignaria28 د ځړولو چلند د پام وړ بدل کړي.برسېره پر دې، لابراتوار او ساحوي مطالعات چې د آفت وژونکو سره د افت وژونکو سناریوګانې (پشمول د فنګسایډونو په شمول) سمبالوي ښودلې چې آفت وژونکي په فزیولوژي 22 مورفولوژي 29 او د شاتو د مچیو او ځینې یوازینۍ مچیو بقا باندې منفي اغیزه کوي.مختلف فنګس وژونکي سپرې په مستقیم ډول د ګل کولو پرمهال په خلاص ګلونو کې کارول کیدی شي د لویانو لخوا د لاروا پراختیا لپاره راټول شوي ګرده ککړ کړي ، چې اغیزې یې مطالعه پاتې دي 30.
دا په زیاتیدونکي توګه پیژندل شوي چې د لاروا وده د هاضمي سیسټم د ګرده او مایکروبیل ټولنو لخوا اغیزمن کیږي.د شاتو مچۍ مایکروبیوم په پیرامیټرو اغیزه کوي لکه د بدن ډله 31، میټابولیک بدلونونه 22 او د ناروغیو په وړاندې حساسیت32.پخوانیو څیړنو د یوازینۍ مچیو په مایکروبیوم باندې د پراختیایي مرحلې، غذايي موادو، او چاپیریال اغیزې معاینه کړې.دې مطالعاتو د لاروا او ګرده مایکروبیومونو په جوړښت او کثرت کې ورته والی څرګند کړ، په بیله بیا د یوازینۍ مچۍ د نوعو په مینځ کې ترټولو عام باکتریا نسل Pseudomonas او Delftia.په هرصورت، که څه هم فنګس وژونکي د مچیو د روغتیا ساتلو لپاره د ستراتیژیو سره تړاو لري، د مستقیم شفاهي تماس له لارې په لاروا مایکروبیوټا باندې د فنګسایډونو اغیزې ناڅرګندې پاتې دي.
دې څیړنې په متحده ایالاتو کې د ونې په میوو کې د کارولو لپاره ثبت شوي د شپږ عام استعمال شوي فنګسي وژونکو ریښتیني نړۍ دوزونو اغیزې ازموینه کړې ، پشمول د تماس او سیسټمیک فنګسي وژونکو درملو چې په شفاهي ډول د ککړ شوي خواړو څخه د جوارو سینګ ورم مچ لاروا ته اداره کیږي.موږ وموندله چې تماس او سیسټمیک فنګس وژونکو د مچیو د بدن وزن کم کړی او د مړینې کچه یې لوړه کړې، د مینکوزیب او پیریتوپیایډ سره خورا سختې اغیزې لري.بیا مو د لاروا د مایکروبیل تنوع پرتله کړه چې د مینکوزیب په درملنه شوي ګرده رژیم کې تغذیه شوي د کنټرول رژیم سره تغذیه شوي.موږ د احتمالي میکانیزمونو په اړه بحث کوو چې د مړینې او اغیزې د مدغم آفتونو او ګرده ګیر مدیریت (IPPM) 36 پروګرامونو لپاره الندې دي.
بالغ O. cornifrons چې په کوکونونو کې په ژمی کې تیریږي د میوو څیړنیز مرکز، Biglerville, PA څخه ترلاسه شوي، او د -3 څخه تر 2°C (±0.3°C) کې زیرمه شوي.د تجربې دمخه (په ټولیزه توګه 600 کوکون).د 2022 په می کې، 100 O. cornifrons cocoons په ورځ کې په پلاستيکي کپونو کې لیږدول شوي (50 cocoons په یوه پیاله کې، DI 5 cm × 15 cm اوږدوالی) او مسحونه د پیالو دننه ځای پرځای شوي ترڅو پرانیستل وده وکړي او د ژاولو وړ سبسټریټ چمتو کړي، په تیږو باندې فشار کم کړي. مچۍ37د حشراتو په پنجره کې دوه پلاستيکي پیالې چې کوکوون لري (30 × 30 × 30 cm، BugDorm MegaView Science Co. Ltd., Taiwan) کې د 10 ملی لیترو فیډرونو سره چې 50٪ سوکروز محلول لري او د څلورو ورځو لپاره ذخیره کړئ ترڅو د تړلو او ملن کولو ډاډ ترلاسه شي.23 درجې سانتي ګراد، نسبي رطوبت 60٪، د فوټوپيريډ 10 l (ټيټ شدت): 14 ورځې.100 ملګرې ښځې او نر هر سهار د شپږو ورځو لپاره (100 هره ورځ) د مڼې د مڼې د ګل کولو په وخت کې په دوو مصنوعي ځنځیرونو کې خوشې شوي (د جال جال: عرض 33.66 × لوړوالی 30.48 × اوږدوالی 46.99 سانتي متره؛ تکمیلی شکل 1).د پنسلوانیا ایالت اربورټم کې کیښودل شوی، چیری ته نږدې (پرونس سیراسس 'ایوبانک' خوږ چیری پای ™)، پیچ (پرونس پرسیکا 'کونټینډر')، پرونس پرسیکا 'PF 27A' فلیمین فیوری®)، ناک (Pyrus perifolia 'Olympic'، Pyrus) perifolia 'شینکو'، Pyrus perifolia 'Shinseiki'، د کورونریا د مڼې ونې (مالوس کوروناریا) او د مڼو ډیری ډولونه (مالوس کوروناریا، مالوس)، د کورني مڼو ونې 'Co-op 30′ Enterprise™، د مالوس مڼې ونې 'کو- Op 31′ Winecrisp™، begonia 'Freedom'، Begonia 'Golden Delicious'، Begonia 'Nova Spy').هر نیلي پلاستيکي الوتونکي کور د دوه لرګیو بکسونو په سر کې ځای لري.په هر نست بکس کې د 800 خالي کرافټ کاغذ ټیوبونه شتون لري (سرپل خلاص، 0.8 سانتي ID × 15 سانتي ایل) (جونسویل کاغذ ټیوب شرکت، میشیګان) په ناپاک سیلوفین ټیوبونو کې داخل شوی (0.7 OD وګورئ پلاستيکي پلګونه (T-1X پلګونه) د نس ناستې سایټ چمتو کوي .
دواړه د ځنځیرونو بکسونه ختیځ ته مخامخ دي او د شنه پلاستيکي باغ کټارو سره پوښل شوي (Everbilt ماډل #889250EB12، د پرانیستلو اندازه 5 × 5 cm، 0.95 m × 100 m) ترڅو د چرګانو او مرغیو د لاسرسي مخه ونیسي او د خاورې په سطحه کې د ځنځیر بکس خاورې ته نږدې کیښودل شي. بکسونهNest box (اضافي شکل 1a).د جوارو هګۍ هره ورځ له ځنځیرونو څخه د 30 ټیوبونو په راټولولو او لابراتوار ته لیږدولو سره راټولې شوې.د کینچی په کارولو سره، د ټیوب په پای کې یوه ټوټه جوړه کړئ، بیا سرپل ټیوب جلا کړئ ترڅو د زیږون حجرې ښکاره کړي.انفرادي هګۍ او د دوی ګرده د منحل شوي سپتولا (Microslide اوزار کټ، BioQuip Products Inc.، California) په کارولو سره لرې شوې.هګۍ په نم فلټر کاغذ کې کیښودل شوې او زموږ په تجربو کې د کارولو دمخه د 2 ساعتونو لپاره د پیټري ډش کې ځای په ځای شوي (اضافی شکل 1b-d).
په لابراتوار کې، موږ د شپږو فنګس وژونکو شفاهي زهرجنیت ارزونه وکړه چې د مڼې د ګل کولو دمخه او په جریان کې کارول شوي په دریو غلظت (0.1X، 0.5X، او 1X، چیرته چې 1X هغه نښه ده چې په هر 100 ګیلن اوبو / جریبه کې کارول کیږي. لوړ ساحه دوز = غلظت په ساحه کې).، جدول 1).هر غلظت 16 ځله تکرار شوی (n = 16).دوه تماس لرونکي فنګسي وژونکي (جدول S1: mancozeb 2696.14 ppm او captan 2875.88 ppm) او څلور سیسټمیک فنګسي وژونکي (جدول S1: pyrithiostrobin 250.14 ppm؛ trifloxystrobin 110.06 ppm؛ myclobutanil azole p.85pm 285.5.5pm) د میوو، سبزیجاتو او آرائشی فصلونو سره تړاو .موږ ګرده د ګردې په کارولو سره همغږي کړه، 0.20 ګرامه یې یوې څاه (24 څاه فالکن پلیټ) ته ولیږدول، او 1 μL د فنګس وژونکو محلول یې اضافه او مخلوط کړل ترڅو د 1 ملي مترو ژورو څاګانو سره pyramidal ګرده جوړه کړي چې هګۍ پکې ځای پرځای شوي.د کوچني سپاتولا په کارولو سره ځای په ځای کړئ (اضافی شکل 1c،d).د Falcon پلیټونه د خونې د حرارت درجه (25 درجې) او 70٪ نسبي رطوبت کې زیرمه شوي.موږ دوی د کنټرول لاروا سره پرتله کړل چې د پاکو اوبو سره یو شان ګرده تغذیه شوي.موږ هره بله ورځ د لاروا وزن ثبت کړ او د لاروا وزن یې اندازه کړ تر هغه چې لاروا د تحلیلي توازن په کارولو سره پریپولل عمر ته ورسیږي (د فشر ساینسي، درستیت = 0.0001 g).په نهایت کې، د جنسی تناسب د 2.5 میاشتو وروسته د کوکون په پرانیستلو سره ارزول شوی.
DNA د ټول O. cornifrons لاروا (n = 3 د درملنې په حالت کې، د مینکوزیب درملنه شوي او نه درملنه شوي ګرده) څخه ایستل شوي او موږ په دې نمونو کې د مایکروبیل تنوع تحلیلونه ترسره کړل، په ځانګړې توګه ځکه چې په مینکوزیب کې د لاروا ترټولو لوړه مړینه لیدل شوې.د MnZn ترلاسه کول.DNA پراخ شوی، د DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA کټ (Zymo Research, Irvine, CA) په کارولو سره پاک شوی، او د v3 کټ په کارولو سره په Illumina® MiSeq™ کې ترتیب شوی (600 سائیکلونه).د باکتریا 16S ریبوسومال RNA جینونو هدف شوي ترتیب د Quick-16S™ NGS کتابتون پریپ کټ (Zymo Research, Irvine, CA) په کارولو سره د 16S rRNA جین V3-V4 سیمه په نښه کولو پرائمرونو په کارولو سره ترسره شو.برسیره پردې، د 18S ترتیب کول د 10٪ PhiX شاملولو په کارولو سره ترسره شوي، او امپلیفیکیشن د پریمر جوړه 18S001 او NS4 په کارولو سره ترسره شوی.
د QIIME2 پایپ لاین (v2022.11.1) په کارولو سره جوړه شوې reads39 وارد او پروسس کړئ.دا لوستونه تراشل شوي او یوځای شوي، او د کیمیریک سلسلې په QIIME2 کې د DADA2 پلگ ان په کارولو سره لیرې شوي (qiime dada2 noise pairing)40.د 16S او 18S ټولګي دندې د آبجیکٹ کلاسیفیر پلگ ان Classify-sklearn او دمخه روزل شوي هنرمند silva-138-99-nb-classifier په کارولو سره ترسره شوي.
ټول تجرباتي معلومات د نورمالیت (شاپیرو-ویلکس) او د توپیرونو همغږي (لیوین ټیسټ) لپاره معاینه شوي.ځکه چې د ډیټا سیټ د پیرامیټریک تحلیلونو انګیرنې پوره نه کړې او بدلون د پاتې پاتې کیدو معیاري کولو کې پاتې راغلی، موږ د دوه فاکتورونو [وخت (درې مرحلې 2، 5 او 8 ورځو) سره یو غیر پارامیټریک دوه طرفه ANOVA (کرسکل والس) ترسره کړ. د وخت ټکي) او فنګس وژونکي] د لاروا تازه وزن باندې د درملنې اغیزې ارزولو لپاره، بیا وروسته د هاک غیر پارامیټریک جوړه پرتله کول د Wilcoxon ازموینې په کارولو سره ترسره شوي.موږ د Poisson ویش سره یو عمومي خطي ماډل (GLM) وکاروو ترڅو د فنګس وژونکو اغیزې په دریو فنګس وژونکو غلظت کې په بقا باندې پرتله کړو 41,42.د توپیر کثرت تحلیل لپاره، د امپلیکون ترتیب ډولونو (ASVs) شمیر د جینس په کچه سقوط شوی.د 16S (د جینس کچه) او 18S نسبي کثرت کارولو ډلو ترمینځ د توپیر کثرت پرتله کول د بیټا صفر انفلیټ شوي (BEZI) کورنۍ توزیع سره د موقعیت ، پیمانه او شکل (GAMLSS) لپاره د عمومي اضافه کولو ماډل په کارولو سره ترسره شوي ، کوم چې په میکرو ماډل شوي. .په مایکروبیوم R43 (v1.1).1).د توپیر تحلیل دمخه د مایټوکونډریال او کلوروپلاسټ ډولونه لرې کړئ.د 18S د مختلف ټیکونومیک کچو له امله ، د هر ټیکون یوازې ټیټه کچه د توپیر تحلیلونو لپاره کارول شوې.ټول احصایوي تحلیلونه د R (v. 3.4.3., CRAN پروژې) (ټیم 2013) په کارولو سره ترسره شوي.
د مینکوزیب، پیریتیوسټروبین، او ټریفلوکسټروبین سره مخ کیدل په O. cornifrons کې د بدن د وزن زیاتوالی د پام وړ کموي (1 انځور).دا اغیزې په دوامداره توګه د ټولو دریو دوزونو ارزول شوي (انځور 1a-c) کې لیدل شوي.Cyclostrobin او myclobutanil د لاروا وزن د پام وړ کم نه کړ.
د ډډ بورر لاروا اوسط تازه وزن د څلورو غذایی درملنې لاندې په دریو وختونو کې اندازه شوی (همجنس ګرده تغذیه + فنګس وژونکي: کنټرول، 0.1X، 0.5X او 1X خوراکونه).(a) ټیټ خوراک (0.1X): لومړی ځل ټکی (ورځ 1): χ2: 30.99، DF = 6؛P < 0.0001، د دویم ځل ټکی (ورځ 5): 22.83، DF = 0.0009؛دریم ځلټکی (8 ورځ): χ2: 28.39, DF = 6;(b) نیم دوز (0.5X): لومړی ځل ټکی (ورځ 1): χ2: 35.67، DF = 6؛P <0.0001، د دوهم ځل ټکی (لومړی ورځ).): χ2: 15.98, DF = 6;پ = 0.0090 ;دریم ځل ټکی (8 ورځ) χ2: 16.47, DF = 6;(c) سایټ یا بشپړ خوراک (1X): لومړی ځل ټکی (ورځ 1) χ2: 20.64، P = 6؛P = 0.0326، د دویم ځل ټکی (ورځ 5): χ2: 22.83، DF = 6;پ = 0.0009 ;دریم ځل ټکی (8 ورځ): χ2: 28.39، DF = 6؛د توپیر غیر پارامیټریک تحلیل.بارونه د جوړو پرتله کولو ± SE معنی څرګندوي (α = 0.05) (n = 16) *P ≤ 0.05، **P ≤ 0.001، ***P ≤ 0.0001.
په ټیټ دوز (0.1X) کې، د لاروا د بدن وزن د ټریفلوکسټروبین سره 60٪، مینکوزیب سره 49٪، مایکلوبوتانیل سره 48٪، او د پیریتیسټروبین (1a شکل) سره 46٪ کم شوی.کله چې د نیمه ساحوي خوراک (0.5X) سره مخ شو، د مینکوزیب لاروا د بدن وزن 86٪ کم شوی، pyrithiostrobin 52٪ او trifloxystrobin 50٪ (تصویر 1b).د منکوزیب یو بشپړ ساحه دوز (1X) د لاروا وزن 82٪، پیریتیوسټروبین 70٪، او trifloxystrobin، myclobutanil او سنګارډ نږدې 30٪ (انځور 1c) کم کړی.
مړینه د لاروا په منځ کې تر ټولو لوړه وه چې د مینکوزیب درملنه شوي ګرده یې تغذیه کړه، ورپسې پیریتیوسټروبین او ټریفلوکسټروبین.د مینکوزیب او پیریتیسولین د دوزونو په زیاتوالي سره د مړینې کچه لوړه شوې (شکل 2؛ جدول 2).په هرصورت، د جوار د بورې مړینه یوازې یو څه زیاته شوې ځکه چې د ټریفلوکسټروبین غلظت ډیر شوی؛سایپروډینیل او کیپتان د کنټرول درملنې په پرتله د پام وړ مړینه زیاته نه کړه.
د بورې مچۍ لاروا مړینه د ګرده د خوړلو وروسته په انفرادي ډول د شپږو مختلف فنګسي وژونکو سره پرتله شوې.منکوزیب او پینټوپایرامایډ د جوار مګګټس (GLM: χ = 29.45, DF = 20, P = 0.0059) (کرښه، سلیپ = 0.29، P <0.001؛ سلیپ = 0.24، <0.005)) ډیر حساس وو.
په اوسط ډول، په ټولو درملنه کې، 39.05٪ ناروغان ښځینه او 60.95٪ نارینه وو.د کنټرول درملنې په منځ کې، د ښځو تناسب د ټیټ دوز (0.1X) او نیم دوز (0.5X) مطالعاتو کې 40٪، او د ساحې دوز (1X) مطالعاتو کې 30٪ و.په 0.1X دوز کې، د ګرده تغذیه شوي لاروا په منځ کې چې د مینکوزیب او مایکلوبوتانیل سره درملنه شوي، 33.33٪ بالغان ښځینه وو، 22٪ بالغان ښځینه، 44٪ بالغ لاروا ښځینه وې، 44٪ بالغ لاروا ښځینه وې.ښځینه، د بالغ لاروا 41٪ ښځینه وې، او کنټرول یې 31٪ وو (3a انځور).په 0.5 ځله دوز کې، د مینکوزیب او pyrithiostrobin ګروپ کې 33٪ بالغ چینجي ښځې وې، 36٪ په trifloxystrobin ګروپ کې، 41٪ په مایکلوبوتانیل ګروپ کې، او 46٪ د سایپروسټروبین ګروپ کې.دا شمیره په ګروپ کې 53٪ وه.په کیپتان ګروپ کې او د کنټرول ګروپ کې 38٪ (انځور 3b).په 1X دوز کې، د مینکوزیب ګروپ 30٪ ښځې وې، 36٪ د پیریتیوسټروبین ګروپ، 44٪ د ټریفلوکسټروبین ګروپ، 38٪ د مایکلوبوتانیل ګروپ، 50٪ د کنټرول ګروپ ښځې وې - 38.5٪ (3c انځور) .
د لاروا مرحلې د فنګس وژونکو د افشا کیدو وروسته د ښځینه او نارینه زنګ وهونکو سلنه.(a) ټیټ دوز (0.1X).(b) نیم دوز (0.5X).(c) د ساحې دوز یا بشپړ دوز (1X).
د 16S ترتیب تحلیل وښودله چې د باکتریا ګروپ د لاروا تر مینځ توپیر لري چې د مینکوزیب درملنه شوي ګرده سره تغذیه شوي او لاروا د غیر درملنې ګرده سره تغذیه شوي (انځور 4a).په ګرده کې د نه درملنه شوي لاروا د مایکروبیل شاخص د هغه لاروا په پرتله لوړ و چې د مینکوزیب درملنه شوي ګرده کې تغذیه شوي (4b شکل).که څه هم د ګروپونو تر مینځ په بډایه کولو کې لیدل شوي توپیر د احصایې له پلوه مهم نه و، دا د هغه په ​​پرتله د پام وړ ټیټ و چې د لاروا د تغذیې لپاره په غیر درملنه شوي ګرده کې لیدل شوي (انځور 4c).نسبي کثرت وښودله چې د لاروا مایکرو بیوټا د کنټرول ګرده کې تغذیه شوي لاروا په پرتله خورا متنوع و چې د مینکوزیب درملنه شوي لاروا (انځور 5a) کې تغذیه شوي.تشریحي تحلیل په کنټرول کې د 28 نسلونو شتون او د مینکوزیب درملنې نمونې په ګوته کړې (5b شکل).c د 18S ترتیب په کارولو سره تحلیل کوم مهم توپیرونه ندي موندلي (اضافی شکل 2).
د SAV پروفایلونه د 16S ترتیبونو پراساس د شینن بډایه سره پرتله شوي او د فیلم په کچه بډایه لیدل شوي.(a) د اصلي همغږي تحلیل (PCoA) د ټول مایکروبیل ټولنې جوړښت پراساس په غیر درملنه شوي ګرده تغذیه یا کنټرول (نیلي) او مینکوزیب تغذیه لاروا (نارنج) کې.هر ډیټا ټکی د جلا نمونې استازیتوب کوي.PCoA د ملټي وییریټ T توزیع د Bray-Curtis فاصلې په کارولو سره محاسبه شوی.اوول د 80٪ باور کچه استازیتوب کوي.(b) بکسپلوټ، د خام شینن شتمنۍ ډاټا (پوائنټونه) او ج.د لیدلو وړ شتمني.بکس پلاټونه د منځنۍ کرښې، د متقابل حد (IQR) او 1.5 × IQR (n = 3) لپاره بکسونه ښیې.
د لاروا د مایکروبیل ټولنو ترکیب چې د مینکوزیب درملنه شوي او نه درملنه شوي ګرده باندې تغذیه کیږي.(a) په لاروا کې د مایکروبیل جینرا نسبي کثرت لوستل کیږي.(b) د پیژندل شوي مایکروبیل ټولنو د تودوخې نقشه.ډیلفتیا (د مساوي تناسب (OR) = 0.67، P = 0.0030) او Pseudomonas (OR = 0.3، P = 0.0074)، مایکروباکتریوم (OR = 0.75، P = 0.0617) (OR = 1.5، P = 0.0060)؛د تودوخې نقشې قطارونه د ارتباطي واټن او اوسط ارتباط په کارولو سره کلستر شوي.
زموږ پایلې ښیي چې د تماس (مینکوزیب) او سیسټمیک (پیروسټروبین او ټریفلوکسټروبین) فنګسي وژونکو سره د خولې تماس چې په پراخه کچه د ګل کولو پرمهال کارول کیږي، د پام وړ وزن کموي او د جوارو لاروا مړینه زیاتوي.برسېره پردې، مینکوزیب د پریپولال مرحلې په جریان کې د مایکروبیوم تنوع او بډایتوب د پام وړ کم کړی.Myclobutanil، یو بل سیسټمیک فنګس وژونکی، په ټولو دریو دوزونو کې د لاروا د بدن وزن د پام وړ کم کړی.دا اغیز په دویمه (ورځ 5) او دریمه (8 ورځ) وخت ټکو کې څرګند شو.برعکس، سایپروډینیل او کیپتان د کنټرول ګروپ په پرتله د وزن زیاتوالی یا بقا د پام وړ کم نه کړ.زموږ د پوهې له مخې، دا لومړی کار دی چې د مختلفو فنګس وژونکو ساحوي نرخونو اغیزې مشخصوي چې د جوارو فصلونو د مستقیمې ګرده افشا کولو له لارې د جوارو د ساتنې لپاره کارول کیږي.
ټول فنګس وژونکي درملنې د کنټرول درملنې په پرتله د بدن د وزن زیاتوالی د پام وړ کم کړی.منکوزیب د لاروا د بدن وزن په اوسط ډول د 51٪ کمولو سره خورا لوی تاثیر درلود ، ورپسې پیریتیوسټروبین.په هرصورت، نورو څیړنو په لاروا مرحلو کې د فنګسي وژونکو ساحوي خوراکونو منفي اغیزو راپور نه دی ورکړی.که څه هم د ډیتیو کاربامات بایوسایدونه د ټیټ حاد زهرجنیت45 ښودل شوي، ایتیلین بیسډیتیو کاربامات (EBDCS) لکه مینکوزیب کولی شي یوریا ایتیلین سلفایډ ته تخریب کړي.په نورو حیواناتو کې د دې متوجینیک اغیزو ته په پام سره، دا تخریب محصول ممکن د لیدل شوي اغیزو لپاره مسؤل وي 46,47.پخوانیو څیړنو ښودلې چې د ایتیلین تیوریا جوړښت د فکتورونو لخوا اغیزمن کیږي لکه د تودوخې لوړوالی 48، د رطوبت کچه ​​49 او د محصول ذخیره کولو اوږدوالی 50.د بایوساید لپاره د ذخیره کولو مناسب شرایط کولی شي دا اړخیزې اغیزې کمې کړي.برسېره پردې، د اروپا د خوړو خوندیتوب ادارې د pyrithiopide د زهرجنیت په اړه اندیښنه څرګنده کړې، کوم چې د نورو حیواناتو د هاضمي سیسټمونو لپاره کارسنجنیک ښودل شوی.
د Mancozeb، pyrithiostrobin او trifloxystrobin په شفاهي ډول د جوارو د بورې لاروا مړینه زیاتوي.برعکس، مایکلوبوتانیل، سیپروسایلین او کیپتان په مړینې هیڅ اغیزه نه درلوده.دا پایلې د Ladurner et al.52 څخه توپیر لري، چا چې ښودلې چې کیپتان د بالغ O. lignaria او Apis mellifera L. (Hymenoptera, Apisidae) بقا د پام وړ کمه کړې.برسېره پر دې، فنګس وژونکي لکه کپتان او بوسکالیډ موندل شوي چې د لاروا مړینه 52,53,54 یا د تغذیې چلند بدلوي.دا بدلونونه، په بدل کې، کولی شي د ګرده تغذیه کیفیت او په نهایت کې د لاروا مرحلې انرژي ترلاسه کړي.مړینه د کنټرول ګروپ کې لیدل شوي د نورو مطالعاتو سره مطابقت درلود 56,57.
زموږ په کار کې د نارینه خوښونکي جنس تناسب لیدل کیدی شي د فکتورونو لخوا تشریح شي لکه ناکافي ملګرۍ او د ګل کولو په وخت کې د هوا ضعیف شرایط، لکه څنګه چې مخکې د ویسینس او ​​بوش لخوا د O. Cornuta لپاره وړاندیز شوی.که څه هم زموږ په څیړنه کې میرمنو او نارینه وو د ملګرتیا لپاره څلور ورځې درلودې (یوه دوره چې عموما د بریالي ملګری لپاره کافي ګڼل کیږي)، موږ په قصدي توګه د فشار کمولو لپاره د رڼا شدت کم کړ.په هرصورت، دا تعدیل کیدای شي په غیر ارادي توګه د ملن پروسې سره مداخله وکړي61.برسېره پردې، مچۍ د څو ورځو ناوړه هوا تجربه کوي، پشمول د باران او ټیټ تودوخې (<5°C)، چې کولی شي د 4,23 په بریالیتوب باندې منفي اغیزه وکړي.
که څه هم زموږ مطالعې په ټول لاروا مایکروبیوم تمرکز کړی، زموږ پایلې د باکتریا ټولنو ترمنځ احتمالي اړیکو ته بصیرت وړاندې کوي چې ممکن د مچیو تغذیه او د فنګس وژونکو افشا کولو لپاره مهم وي.د بېلګې په توګه، لاروا تغذیه شوي منکوزب-درمل شوي ګرده د مایکروبیل ټولنې جوړښت او کثرت د لاروا لخوا تغذیه شوي ګرده په پرتله د پام وړ کم کړی و.په لاروا کې چې نه درملنه شوي ګرده مصرفوي، د باکتریا ګروپونه پروټوباکټیریا او ایکټینوباکټریا غالب وو او په عمده ډول ایروبیک یا فاکولتيکي ایروبیک وو.ډیلفټ باکتریا، معمولا د یوازینۍ مچۍ له نوعو سره تړاو لري، د انټي بیوټیک فعالیت لپاره پیژندل کیږي، چې د ناروغیو په وړاندې احتمالي محافظتي رول په ګوته کوي.د باکتریا یو بل ډول، Pseudomonas، په لاروا کې چې د نه درملنې وړ ګرده تغذیه شوي په پراخه کچه شتون درلود، مګر د مینکوزیب درملنې لاروا کې د پام وړ کم شوی.زموږ پایلې د پخوانیو مطالعاتو مالتړ کوي چې Pseudomonas په O. bicornis35 او نورو solitary wasps34 کې یو له خورا بډایه نسل په توګه پیژني.که څه هم د O. cornifrons په روغتیا کې د Pseudomonas د رول لپاره تجربوي شواهد ندي مطالعه شوي، دا باکتریا ښودل شوي چې د بیټل Paederus fuscipes کې د محافظتي زهرونو ترکیب ته وده ورکوي او په ویټرو 35, 65 کې د ارګینین میټابولیزم هڅوي. دا مشاهدې وړاندیز کوي. د O. Cornifrons لاروا د پراختیا په وخت کې د ویروس او باکتریا په دفاع کې احتمالي رول.مایکروباکتریوم یو بل جینس دی چې زموږ په څیړنه کې پیژندل شوی چې د لوږې په شرایطو کې د تور سپاهیانو مچانو لاروا کې په لوړه شمیره کې شتون لري.په O. Cornifrons لاروا کې، مایکروباکتریا ممکن د فشار په شرایطو کې د کولمو مایکروبیوم توازن او انعطاف کې مرسته وکړي.برسیره پردې، روډوکوکس په O. cornifrons لاروا کې موندل کیږي او د دې د پاکولو وړتیاو لپاره پیژندل کیږي67.دا جینس د A. florea په کولمو کې هم موندل کیږي مګر په خورا ټیټ کثرت کې.زموږ پایلې د ډیری مایکروبیل ټیکا په اوږدو کې د ډیری جینیاتي تغیراتو شتون ښیې چې کولی شي په لاروا کې میټابولیک پروسې بدل کړي.په هرصورت، د O. cornifrons د فعال تنوع په اړه ښه پوهاوی ته اړتیا ده.
په لنډیز کې، پایلې ښیي چې مینکوزیب، پیریتیوسټروبین، او ټریفلوکسټروبین د بدن وزن کموي او د جوار بورر لاروا مړینه زیاتوي.که څه هم په ګرده ګانو باندې د فنګسي وژونکو اغیزو په اړه مخ په ډیریدو اندیښنه شتون لري، د دې مرکبونو د پاتې میټابولیت اغیزو ښه پوهیدو ته اړتیا ده.دا پایلې د ګرده افشاني مدیریت د مربوط پروګرامونو په سپارښتنو کې شامل کیدی شي چې له کروندګرو سره مرسته کوي چې د میوو د ونو د ګل کولو څخه مخکې او د فنګسي وژونکو په ټاکلو او د کارولو د وخت په توپیر سره، یا د لږ زیان رسونکي بدیلونو کارولو هڅولو له لارې د ځینې فنګسي وژونکو کارولو مخه ونیسي 36. دا معلومات. د سپارښتنو د پراختیا لپاره مهم دی.د آفت وژونکو کارولو په اړه، لکه د موجوده سپری پروګرامونو تنظیم کول او د سپری وخت بدلول کله چې د فنګس وژونکو انتخاب کول یا د لږ خطرناک بدیلونو کارولو ته وده ورکول.د جنس تناسب، د تغذیې چلند، د کولمو مایکروبیوم، او د جوار د وزن کمولو او مړینې په اړه د مالیکول میکانیزمونو په اړه د فنګس وژونکو منفي اغیزو په اړه نورې څیړنې ته اړتیا ده.
د سرچینې ډاټا 1، 2 او 3 په شکل 1 او 2 کې د فیګشیر ډیټا ذخیره DOI کې زیرمه شوي: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 او https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996233.په اوسنۍ څیړنه کې تحلیل شوي سلسلې (انځور. 4, 5) د NCBI SRA په ذخیره کې د PRJNA1023565 شمیرې الندې شتون لري.
Bosch, J. and Kemp, WP پراختیا او د شاتو د مچیو ډولونه د کرنیزو فصلونو ګرده کونکي په توګه رامینځته کول: د نسل اوسمیا بیلګه.(Hymenoptera: Megachilidae) او میوه لرونکي ونې.بیلنورسرچینه92، 3-16 (2002).
پارکر، MG et al.په نیویارک او پنسلوانیا کې د مڼو د کروندګرو په منځ کې د ګرده اچولو کړنې او د بدیل ګرده ګیرانو نظرونه.تازهکرنه.د خوړو سیسټمونه.35، 1-14 (2020).
کوچ I.، Lonsdorf EW، Artz DR، Pitts-Singer TL او Ricketts TH د بادامو د ګرده کولو اقتصاد او د اصلي مچیو په کارولو سره.J. اقتصاد.نور111، 16-25 (2018).
لی، ای، هغه، یو، او پارک، Y.-L.د ټریګوپان فینولوژي په اړه د اقلیم بدلون اغیزې: د نفوس مدیریت لپاره اغیزې.پورته کول.بدلون 150، 305–317 (2018).
Artz, DR او Pitts-Singer, TL د فنګس وژونکو اغیزې او د دوه منظم شوي شاتو مچیو (Osmia lignaria and Megachile rotundata).PloS One 10, e0135688 (2015).
Beauvais، S. et al.د ټیټ زهرجن فصل فنګس وژونکي (فینبوکونازول) د نارینه تناسلي کیفیت سیګنالونو سره مداخله کوي چې په پایله کې یې په ځنګلي یوازیتوب مچیو کې د ملن بریالیتوب کم شوی.J. Apps.ایکولوژي59، 1596-1607 (2022).
Sgolastra F. et al.Neonicotinoid حشره وژونکي او ergosterol biosynthesis د مچیو په دریو ډولونو کې د synergistic فنګس وژونکو مړینه کموي.د آفتونو کنټرول.ساینس73، 1236-1243 (2017).
Kuhneman JG، Gillung J، Van Dyck MT، Fordyce RF.او د ډانفورت BN سولیټری ویپ لاروا د باکتریا تنوع بدلوي چې د ګردې په واسطه د ډډ ځړونکي مچیو Osmia cornifrons (Megachilidae) لپاره چمتو کیږي.مخمایکرو ارګانیزم13، 1057626 (2023).
Dharampal PS, Danforth BN او Steffan SA په خمیر شوي ګرده کې اکټوسیمبیوټیک مایکرو ارګانیزمونه د یوازینۍ مچۍ د ودې لپاره دومره مهم دي لکه پخپله ګرده.ایکولوژيتکامل12. e8788 (2022).
Kelderer M، Manici LM، Caputo F او Thalheimer M. د مڼو په باغونو کې د قطارونو په منځ کې کښت کول ترڅو د بیالبیلو ناروغیو کنټرول: د مایکروبیل شاخصونو پر بنسټ د عملي اغیزمنتیا مطالعه.د نبات خاوره 357، 381-393 (2012).
مارتین PL، Kravchik T.، Khodadadi F.، Achimovich SG او Peter KA د متحده ایالاتو په منځنی اتلانتیک کې د مڼو بیټر روټ: د لاملونو ډولونو ارزونه او د سیمه ایزو هوا شرایطو او د کښت حساسیت اغیزه.فیټوپاتولوژي 111، 966-981 (2021).
کولن MG، تامپسن LJ، کارولان JK، Stout JK.او سټینلي DA فنګسایډونه، واښه وژونکي او مچۍ: د موجوده څیړنو او میتودونو سیسټمیک بیاکتنه.PLOS One 14، e0225743 (2019).
Pilling, ED and Jepson, PC د EBI فنګس وژونکو او د شاتو په مچیو (Apis mellifera) باندې د پیریتروایډ حشراتو ضد اغیزې.آفتونه ساینس.39، 293-297 (1993).
Mussen, EC, Lopez, JE and Peng, CY د شاتو مچیو لاروا Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae) وده او پراختیا باندې د ټاکل شوي فنګسي وژونکو اغیز.چهارشنبه.نور33، 1151-1154 (2004).
وان ډایک، ایم، مولن، ای.، ویکسټډ، ډي، او مک ارټ، ایس. د ونو په باغونو کې د ګرده ګیرانو د ساتنې لپاره د آفت وژونکو کارولو لپاره د پریکړې لارښود (کارنیل پوهنتون، 2018).
Iwasaki, JM او Hogendoorn, K. غیر حشره وژونکو ته د مچیو ښکاره کول: د میتودونو بیاکتنه او راپور شوي پایلې.کرنه.ایکوسیستمچهارشنبه.۳۱۴، ۱۰۷۴۲۳ (۲۰۲۱).
Kopit AM، Klinger E، Cox-Foster DL، Ramirez RA.او د Pitts-Singer TL د اکمالاتو ډول او د آفت وژونکو افت وژونکو اغیزې د آسمیا لیګنریا لاروا پراختیا باندې (Hymenoptera: Megachilidae).چهارشنبه.نور51، 240-251 (2022).
Kopit AM او Pitts-Singer TL لارې د آفت وژونکو د یوازینۍ خالي ځالې د مچیو سره مخ کیږي.چهارشنبه.نور47، 499-510 (2018).
پین، NT او نور.په بالغ جاپاني باغ کې مچیو (اسمیا کارنیفرون) کې د آفت وژونکو زهرجنیت ارزولو لپاره د انجیکشن بایوسای پروتوکول.ساینسراپورونه 10، 9517 (2020).