د فنګس وژونکو ضمیمه کول په یوازیني میسن مچیو کې د خالص انرژۍ لاسته راوړنه او د مایکروبیوم تنوع کموي.

د Nature.com د لیدنې لپاره مننه. د هغه براوزر نسخه چې تاسو یې کاروئ د CSS ملاتړ محدود دی. د غوره پایلو لپاره، موږ سپارښتنه کوو چې تاسو د خپل براوزر نوې نسخه وکاروئ (یا په انټرنیټ اکسپلورر کې د مطابقت حالت غیر فعال کړئ). په عین حال کې، د دوامداره ملاتړ ډاډ ترلاسه کولو لپاره، موږ سایټ پرته له سټایل کولو یا جاواسکریپټ څخه ښکاره کوو.
فنګس وژونکي اکثرا د ونو د میوو د ګل کولو په جریان کې کارول کیږي او کولی شي د حشراتو ګرده افشاني کونکي ګواښ کړي. په هرصورت، د دې په اړه لږ معلومات شتون لري چې غیر مچۍ ګرده افشاني کونکي (د بیلګې په توګه، یوازینۍ مچۍ، اوسمیا کارنیفرون) د تماس او سیسټمیک فنګس وژونکو ته څنګه ځواب ورکوي چې معمولا د ګل کولو پرمهال په مڼو کې کارول کیږي. دا د پوهې تشه د خوندي غلظت او د فنګس وژونکو سپری کولو وخت ټاکلو تنظیمي پریکړې محدودوي. موږ د دوه تماس فنګس وژونکو (کیپټان او مینکوزیب) او څلورو انټرلییر/فایټوسیسټم فنګس وژونکو (سیپروسایکلین، مایکلوبوتانیل، پیروسټروبین او ټرایفلوکسایسټروبین) اغیزې ارزولې. د لاروا وزن زیاتوالي، بقا، جنس تناسب او باکتریا تنوع باندې اغیزې. ارزونه د اوږدمهاله شفاهي بایو ازموینې په کارولو سره ترسره شوه چې پکې ګرده په دریو دوزونو کې د ساحې کارولو لپاره د اوسني وړاندیز شوي دوز (1X)، نیم خوراک (0.5X) او ټیټ خوراک (0.1X) پراساس درملنه شوې. د مینکوزیب او پیریټیسولین ټولو دوزونو د بدن وزن او د لاروا بقا د پام وړ کمه کړې. بیا موږ د 16S جین ترتیب کړ ترڅو د مینکوزیب د لاروا باکتریا مشخص کړي، هغه فنګس وژونکی چې د لوړې مړینې مسؤلیت لري. موږ وموندله چې د مینکوزیب درملنې شوي ګرده باندې تغذیه شوي لاروا کې د باکتریا تنوع او کثرت د پام وړ کم شوی. زموږ د لابراتوار پایلې ښیې چې د ګل کولو پرمهال د دې فنګس وژونکو ځینې سپری کول په ځانګړي ډول د O. cornifrons روغتیا ته زیان رسوي. دا معلومات د میوو د ونو د ساتنې محصولاتو دوامداره کارونې په اړه د راتلونکي مدیریت پریکړو لپاره اړونده دي او د ګرده کونکو د ساتنې لپاره د تنظیمي پروسو لپاره اساس په توګه کار کوي.
د میسن یوازینۍ مچۍ اوسمیا کارنیفرون (هایمینوپټیرا: میګاچیلیډی) د ۱۹۷۰ لسیزې په وروستیو او د ۱۹۸۰ لسیزې په لومړیو کې له جاپان څخه متحده ایالاتو ته معرفي شوه، او دا نوعه له هغه وخت راهیسې په منظم ایکوسیستم کې مهم ګرده اچوونکی رول لوبولی دی. د دې مچۍ طبیعي نفوس د وحشي مچیو د شاوخوا ۵۰ ډولونو برخه ده چې د هغو مچیو بشپړونکي دي چې په متحده ایالاتو کې د بادامو او مڼو باغونه ګرده اچوي ۲،۳. میسن مچۍ له ډیرو ننګونو سره مخ دي، پشمول د استوګنې ټوټې کول، رنځجنونه، او آفت وژونکي ۳،۴. د حشراتو وژونکو په مینځ کې، فنګس وژونکي د انرژۍ لاسته راوړنه، د خوړو راټولول ۵ او د بدن حالت ۶،۷ کموي. که څه هم وروستي څیړنې ښیي چې د میسن مچۍ روغتیا په مستقیم ډول د کامنسل او ایکټوباکټیک مایکرو ارګانیزمونو لخوا اغیزمن کیږي، ۸،۹ ځکه چې باکتریا او فنګسي کولی شي تغذیه او معافیت غبرګون اغیزمن کړي، د میسن مچۍ د مایکروبیل تنوع باندې د فنګس وژونکو افشا کیدو اغیزې یوازې د مطالعې پیل دي.
د مختلفو اغیزو لرونکي فنګس وژونکي (تماس او سیسټمیک) د ګل کولو دمخه او د ګل کولو په جریان کې په باغونو کې سپریږي ترڅو د مڼو سکاب، ترخه روټ، نسواري روټ او پوډري میلډو په څیر ناروغیو درملنه وکړي10,11. فنګس وژونکي د ګرده ګیرو لپاره بې ضرره ګڼل کیږي، نو د ګل کولو په دوره کې باغبانانو ته سپارښتنه کیږي؛ د مچیو لخوا د دې فنګس وژونکو افشا کول او خوړل نسبتا ښه پیژندل شوي، ځکه چې دا د متحده ایالاتو د چاپیریال ساتنې ادارې او ډیری نورو ملي تنظیم کونکو ادارو لخوا د آفت وژونکو د راجسټریشن پروسې برخه ده12,13,14. په هرصورت، په غیر مچیو باندې د فنګس وژونکو اغیزې لږ پیژندل شوي ځکه چې دوی په متحده ایالاتو کې د بازار موندنې د اجازې تړونونو لاندې اړین ندي15. سربیره پردې، په عمومي ډول د واحدو مچیو ازموینې لپاره هیڅ معیاري پروتوکولونه شتون نلري16,17، او د هغو کالونیو ساتل چې د ازموینې لپاره مچۍ چمتو کوي ننګونه ده18. د مختلفو مدیریت شوي مچیو آزموینې په اروپا او متحده ایالاتو کې په زیاتیدونکي توګه ترسره کیږي ترڅو د وحشي مچیو باندې د آفت وژونکو اغیزو مطالعه وکړي، او پدې وروستیو کې د O. cornifrons19 لپاره معیاري پروتوکولونه رامینځته شوي.
ښکر لرونکي مچۍ مونوسایټونه دي او په سوداګریزه توګه د شاتو مچیو لپاره د ضمیمه یا بدیل په توګه د کارپ فصلونو کې کارول کیږي. دا مچۍ د مارچ او اپریل په مینځ کې راڅرګندیږي، د وخت نه مخکې نارینه د ښځینه مچیو څخه درې یا څلور ورځې مخکې راڅرګندیږي. د ملګرتیا وروسته، ښځینه په فعاله توګه ګرده او نیکټار راټولوي ترڅو د ټیوبلر ځالې غار دننه د زیږون حجرو لړۍ چمتو کړي (طبیعي یا مصنوعي) 1,20. هګۍ د حجرو دننه په ګرده کې ایښودل کیږي؛ ښځینه بیا د بلې حجرې چمتو کولو دمخه د خټې دیوال جوړوي. لومړی انسټار لاروا په کورین کې تړل شوي او د جنین مایعاتو باندې تغذیه کوي. له دوهم څخه تر پنځم انسټار (پریپوپا) پورې، لاروا په ګرده کې تغذیه کوي 22. یوځل چې د ګرده عرضه په بشپړ ډول له مینځه لاړه شي، لاروا کوکون جوړوي، پوپټ کوي او په ورته زیږون خونه کې د لویانو په توګه راڅرګندیږي، معمولا د دوبي په وروستیو کې 20,23. لویان په راتلونکي پسرلي کې راڅرګندیږي. د لویانو بقا د خوړو د ترلاسه کولو پراساس د خالص انرژۍ لاسته راوړلو (وزن زیاتوالي) سره تړاو لري. په دې توګه، د ګرده تغذیه کیفیت، او همدارنګه نور عوامل لکه هوا یا د آفت وژونکو سره مخ کیدل، د ژوندي پاتې کیدو او روغتیا ټاکونکي دي 24.
حشره وژونکي او فنګس وژونکي چې د ګل کولو دمخه کارول کیږي د نبات د رګونو دننه په مختلفو درجو کې حرکت کولی شي، له ټرانسلامینر څخه (د مثال په توګه، د پاڼو د پورتنۍ سطحې څخه ښکته سطحې ته د حرکت کولو توان لري، لکه ځینې فنګس وژونکي) 25 ته په ریښتیا سره سیسټمیک اغیزې.، کوم چې کولی شي د ریښو څخه تاج ته ننوځي، کولی شي د مڼو ګلونو امرت ته ننوځي 26، چیرې چې دوی کولی شي بالغ O. cornifrons وژني 27. ځینې آفت وژونکي هم ګرده ته ننوځي، د جوارو لاروا پراختیا اغیزه کوي او د دوی د مړینې لامل کیږي 19. نورو مطالعاتو ښودلې چې ځینې فنګس وژونکي کولی شي د اړوند ډولونو O. lignaria 28 د ځالې کولو چلند د پام وړ بدل کړي. سربیره پردې، د آفت وژونکو د افشا کیدو سناریوګانو (د فنګس وژونکو په شمول) تقلید کولو لابراتوار او ساحوي مطالعاتو ښودلې چې آفت وژونکي د شاتو مچیو او ځینې یوازینۍ مچیو فیزیولوژي 22 مورفولوژي 29 او بقا منفي اغیزه کوي. د ګل کولو پرمهال په مستقیم ډول خلاص ګلونو ته پلي شوي مختلف فنګس وژونکي سپرې ممکن د لاروا پراختیا لپاره د لویانو لخوا راټول شوي ګرده ککړ کړي، چې اغیزې یې لاهم مطالعه کیږي 30.
دا په زیاتیدونکې توګه پیژندل کیږي چې د لاروا وده د هاضمي سیسټم د ګرده او مایکروبیل ټولنو لخوا اغیزمن کیږي. د شاتو مچۍ مایکروبیوم د بدن وزن 31، میټابولیک بدلونونه 22 او د ناروغیو په وړاندې حساسیت 32 په څیر پیرامیټرونو اغیزه کوي. پخوانیو مطالعاتو د یوازینۍ مچۍ مایکروبیوم باندې د پراختیا مرحلې، مغذي موادو او چاپیریال اغیزې معاینه کړې دي. دې مطالعاتو د لاروا او ګرده مایکروبیومونو 33 جوړښت او کثرت کې ورته والی څرګند کړ، او همدارنګه د یوازینۍ مچۍ ډولونو ترمنځ د باکتریا ترټولو عام نسل Pseudomonas او Delftia. په هرصورت، که څه هم فنګس وژونکي د مچۍ روغتیا ساتنې لپاره ستراتیژیو سره تړاو لري، د مستقیم شفاهي تماس له لارې د لاروا مایکروبیوټا باندې د فنګس وژونکو اغیزې ناڅرګندې پاتې دي.
دې څېړنې د شپږو عامو کارول شویو فنګس وژونکو د ریښتیني نړۍ دوزونو اغیزې ازمولې چې په متحده ایالاتو کې د ونو په میوو باندې د کارولو لپاره ثبت شوي، په شمول د تماس او سیسټمیک فنګس وژونکو چې د ککړ شوي خواړو څخه د جوارو د سینګ ورم پتنګ لاروا ته په شفاهي ډول ورکول کیږي. موږ وموندله چې تماس او سیسټمیک فنګس وژونکو د مچیو د بدن وزن کم کړی او د مړینې کچه یې لوړه کړې، چې خورا سختې اغیزې یې د مینکوزیب او پیریتیوپایډ سره تړاو لري. بیا موږ د لاروا د مایکروبیل تنوع پرتله کړه چې د مینکوزیب درملنې شوي ګرده رژیم کې تغذیه شوي د کنټرول رژیم کې تغذیه شوي. موږ د مړینې لاندې احتمالي میکانیزمونو او د مدغم آفتونو او ګرده کونکي مدیریت (IPPM)36 پروګرامونو لپاره اغیزې په اړه بحث کوو.
د بالغ O. کارنیفرون چې په ژمي کې په کوکونونو کې تیروي د میوو د څیړنې مرکز، بیګلرویل، پنسلوانیا څخه ترلاسه شوي او په −3 څخه تر 2 درجو سانتي ګراد (±0.3 درجو سانتي ګراد) کې زیرمه شوي. د تجربې دمخه (په ټولیز ډول 600 کوکون). د می په 2022 کې، 100 O. کارنیفرون کوکونونه هره ورځ په پلاستيکي پیالو کې لیږدول شوي (په هر پیاله کې 50 کوکون، DI 5 سانتي متره × 15 سانتي متره اوږد) او مسحونه د پیالو دننه ځای په ځای شوي ترڅو خلاصیدو ته وده ورکړي او د ژاولو وړ سبسټریټ چمتو کړي، چې په ډبرو مچیو فشار کم کړي 37. دوه پلاستيکي پیالې چې کوکون لري د حشراتو په پنجره کې ځای په ځای کړئ (30 × 30 × 30 سانتي متره، BugDorm MegaView Science Co. Ltd., Taiwan) د 10 ملی لیتر فیډرونو سره چې 50٪ سوکروز محلول لري او د څلورو ورځو لپاره ذخیره کړئ ترڅو تړل او یوځای کول ډاډمن شي. 23 ° C، نسبي رطوبت 60٪، د فوتوپیریډ 10 l (ټیټ شدت): 14 ورځې. ۱۰۰ جوړې شوې ښځې او نارینه هره سهار د شپږو ورځو لپاره (په ورځ کې ۱۰۰) د مڼو د ګل کولو په وخت کې په دوو مصنوعي ځالو کې خوشې شوي وو (د جال ځاله: پلنوالی ۳۳.۶۶ × لوړوالی ۳۰.۴۸ × اوږدوالی ۴۶.۹۹ سانتي متره؛ ضمیمه شکل ۱). د پنسلوانیا ایالت په اربوریتم کې د چیری سره نږدې موقعیت لري (پرونس سیراسس 'یوبنک' سویټ چیری پائی™)، شفتالو (پرونس پرسیکا 'کانټینډر')، پرونس پرسیکا 'PF 27A' فلیمین فیوری®)، ناک (پیرس پیریفولیا 'اولمپیک'، پیرس پیریفولیا 'شینکو'، پیرس پیریفولیا 'شینسیکي')، کوروناریا د مڼو ونې (مالوس کوروناریا) او د مڼو ونو ډیری ډولونه (مالوس کوروناریا، مالوس)، د مڼو کورني ونې 'کو-اپ 30′ انټرپرائز™، د مالوس د مڼو ونې 'کو-اپ 31′ وینکریسپ™، بیګونیا 'فریډم'، بیګونیا 'ګولډن ډیلیسیس'، بیګونیا 'نووا سپای'). هر نیلي پلاستيکي مرغۍ کور د دوو لرګیو بکسونو په سر کې ځای په ځای کیږي. په هر ځاله بکس کې ۸۰۰ خالي کرافټ کاغذ ټیوبونه وو (سرپل خلاص، ۰.۸ سانتي متره ID × ۱۵ سانتي متره L) (جونزویل کاغذ ټیوب شرکت، میشیګان) چې په مبهم سیلوفین ټیوبونو کې داخل شوي وو (۰.۷ OD وګورئ پلاستيکي پلګونه (T-1X پلګونه) د ځالې ځایونه چمتو کوي.
دواړه د ځالې بکسونه ختیځ ته مخامخ وو او د شنه پلاستيکي باغ کټارې سره پوښل شوي وو (ایوربیلټ ماډل #889250EB12، د پرانیستلو اندازه 5 × 5 سانتي متره، 0.95 متر × 100 متر) ترڅو د موږکانو او مرغیو د لاسرسي مخه ونیسي او د ځالې بکس د خاورې بکسونو تر څنګ د خاورې په سطحه کې ځای پر ځای شوي وو. د ځالې بکس (ضمیمه انځور 1a). د جوارو بوره هګۍ هره ورځ د ځالې څخه 30 ټیوبونه راټولولو او لابراتوار ته لیږدولو سره راټولې شوې. د قینچۍ په کارولو سره، د ټیوب په پای کې یوه ټوټه جوړه کړئ، بیا د مرغیو حجرو د افشا کولو لپاره سرپل ټیوب جلا کړئ. انفرادي هګۍ او د دوی ګرده د منحني سپاتولا په کارولو سره لرې شوي (د مایکروسلایډ وسیلې کټ، بایو کیوپ محصولاتو شرکت، کالیفورنیا). هګۍ په نم فلټر کاغذ کې کینول شوې او زموږ په تجربو کې د کارولو دمخه د 2 ساعتونو لپاره په پیټري ډش کې ځای پر ځای شوې (ضمیمه انځور 1b-d).
په لابراتوار کې، موږ د شپږو فنګس وژونکو د خولې زهریت ارزونه وکړه چې د مڼو د ګل کولو دمخه او د ګل کولو په جریان کې په دریو غلظتونو کې کارول شوي (0.1X، 0.5X، او 1X، چیرې چې 1X هغه نښه ده چې په هر 100 ګیلن اوبو / ایکر کې کارول کیږي. لوړ د ساحې دوز = په ساحه کې غلظت).، جدول 1). هر غلظت 16 ځله تکرار شو (n = 16). دوه تماس فنګس وژونکي (جدول S1: مینکوزیب 2696.14 ppm او کیپتان 2875.88 ppm) او څلور سیسټمیک فنګس وژونکي (جدول S1: پیریتیوسټروبین 250.14 ppm؛ ټرای فلوکسیسټروبین 110.06 ppm؛ مایکلوبوتانیل ایزول 75 .12 ppm؛ سایپروډینیل 280.845 ppm) د میوو، سبزیجاتو او زینتي فصلونو لپاره زهریت. موږ ګرده د ګرینډر په کارولو سره همجنسه کړه، 0.20 ګرامه یې یوې څاه (24 څاه فالکن پلیټ) ته انتقال کړه، او د 1 μL فنګس وژونکي محلول اضافه او مخلوط کړ ترڅو د 1 ملي میتر ژورو څاه ګانو سره د هرمي ګرده جوړه کړي چیرې چې هګۍ ځای په ځای شوي. د کوچني سپاتولا په کارولو سره ځای په ځای کړئ (ضمیمه شکل 1c، d). د فالکن پلیټونه د خونې په تودوخه (25 ° C) او 70٪ نسبي رطوبت کې زیرمه شوي. موږ دوی د کنټرول لاروا سره پرتله کړل چې د پاکو اوبو سره درملنه شوي یو همجنسي ګرده رژیم ورکړل شوی و. موږ د مړینې کچه ثبت کړه او هره بله ورځ د لاروا وزن اندازه کړ تر هغه چې لاروا د تحلیلي توازن په کارولو سره د ماشوم زیږون دمخه عمر ته ورسید (فشر ساینسي، دقت = 0.0001 g). په پای کې، د جنس تناسب د 2.5 میاشتو وروسته د کوکون په خلاصولو سره ارزول شو.
DNA د ټول O. cornifrons لاروا څخه استخراج شو (n = 3 د درملنې په حالت کې، د مینکوزیب لخوا درملنه شوي او غیر درملنه شوي ګرده) او موږ په دې نمونو کې د مایکروبیل تنوع تحلیلونه ترسره کړل، په ځانګړي توګه ځکه چې په مینکوزیب کې د لاروا کې ترټولو لوړه مړینه لیدل شوې. MnZn ترلاسه کول. DNA د DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA کټ (Zymo Research, Irvine, CA) په کارولو سره پراخه شوی، پاک شوی، او د v3 کټ په کارولو سره په Illumina® MiSeq™ کې ترتیب شوی (600 دورې). د باکتریا 16S ریبوسومل RNA جینونو هدفمند ترتیب د Quick-16S™ NGS Library Prep Kit (Zymo Research, Irvine, CA) په کارولو سره د 16S rRNA جین د V3-V4 سیمې په نښه کولو پرائمرونو په کارولو سره ترسره شو. سربیره پردې، د 18S ترتیب د 10٪ PhiX شاملولو په کارولو سره ترسره شو، او د پرائمر جوړه 18S001 او NS4 په کارولو سره پراخ شوی.
د QIIME2 پایپ لاین (v2022.11.1) په کارولو سره د جوړې شوي لوستلو 39 وارد او پروسس کړئ. دا لوستلونه لنډ او یوځای شوي وو، او د QIIME2 (qiime dada2 noise pairing) کې د DADA2 پلگ ان په کارولو سره د چیمریک ترتیبونه لرې شوي وو. د 16S او 18S ټولګي دندې د آبجیکټ کټګوریفیر پلگ ان Classify-sklearn او دمخه روزل شوي هنري اثار silva-138-99-nb-classifier په کارولو سره ترسره شوې.
ټول تجربوي معلومات د نورمالیت (شاپیرو-ویلکس) او د تغیراتو د یووالي (لیون ازموینه) لپاره معاینه شوي. ځکه چې د معلوماتو سیټ د پیرامیټریک تحلیل انګیرنې پوره نه کړې او بدلون د پاتې شونو معیاري کولو کې پاتې راغلی، موږ د لاروا تازه وزن باندې د درملنې اغیز ارزولو لپاره د دوه فکتورونو [وخت (درې مرحلې 2، 5، او 8 ورځو وخت ټکي) او فنګس وژونکي] سره غیر پیرامیټریک دوه اړخیزه ANOVA (کروسکل-والیس) ترسره کړ، بیا د ویلکوکسن ازموینې په کارولو سره د هاک وروسته غیر پیرامیټریک جوړه پرتله کول ترسره شول. موږ د پویسون ویش سره یو عمومي خطي ماډل (GLM) وکاراوه ترڅو د فنګس وژونکو اغیزې د دریو فنګس وژونکو غلظت 41،42 کې د بقا په اړه پرتله کړو. د توپیر کثرت تحلیل لپاره، د امپلیکون ترتیب ډولونو (ASVs) شمیر د جینس په کچه سقوط شو. د 16S (د نسل کچه) او 18S نسبي کثرت کارولو ډلو ترمنځ د توپیر کثرت پرتله کول د موقعیت، پیمانه، او شکل (GAMLSS) لپاره د عمومي اضافه کولو ماډل په کارولو سره ترسره شوي چې د بیټا صفر انفلیټډ (BEZI) کورنۍ ویش سره، کوم چې په میکرو ماډل شوي وو. په مایکرو بایوم R43 (v1.1) کې. 1). د توپیر تحلیل دمخه د مایټوکونډریال او کلوروپلاسټ ډولونه لرې کړئ. د 18S د مختلف ټیکونومیک کچو له امله، د هر ټیکون یوازې ترټولو ټیټه کچه د توپیر تحلیلونو لپاره کارول شوې وه. ټول احصایوي تحلیلونه د R (v. 3.4.3.، CRAN پروژه) (ټیم 2013) په کارولو سره ترسره شوي.
د مینکوزیب، پیریتیوسټروبین، او ټرای فلوکسیسټروبین سره مخ کیدل د O. کارنیفرونونو کې د بدن وزن کې د پام وړ کمښت راوست (شکل 1). دا اغیزې په دوامداره توګه د ټولو دریو ارزول شویو دوزونو لپاره لیدل شوي (شکل 1a-c). سایکلوسټروبین او مایکلوبوتانیل د لاروا وزن د پام وړ کم نه کړ.
د ډډ بورر لاروا د تازه وزن اوسط د څلورو غذايي درملنې لاندې په دریو وختونو کې اندازه کیږي (همجنس ګرده خواړه + فنګس وژونکي: کنټرول، 0.1X، 0.5X او 1X خوراکونه). (a) ټیټ خوراک (0.1X): د لومړي ځل لپاره نقطه (ورځ 1): χ2: 30.99، DF = 6؛ P < 0.0001، دوهم ځل لپاره نقطه (ورځ 5): 22.83، DF = 0.0009؛ دریم ځل؛ ټکی (ورځ 8): χ2: 28.39، DF = 6؛ (b) نیم خوراک (0.5X): د لومړي ځل لپاره نقطه (ورځ 1): χ2: 35.67، DF = 6؛ P < 0.0001، دوهم ځل لپاره نقطه (ورځ 1). ): χ2: 15.98، DF = 6؛ P = 0.0090؛ د دریم وخت نقطه (ورځ ۸) χ2: 16.47، DF = 6؛ (c) سایټ یا بشپړ خوراک (1X): د لومړي وخت نقطه (ورځ لومړۍ) χ2: 20.64، P = 6؛ P = 0.0326، د دوهم وخت نقطه (ورځ پنځمه): χ2: 22.83، DF = 6؛ P = 0.0009؛ د دریم وخت نقطه (ورځ ۸): χ2: 28.39، DF = 6؛ د تغیر غیر پیرامیټریک تحلیل. بارونه د جوړې پرتله کولو اوسط ± SE استازیتوب کوي (α = 0.05) (n = 16) *P ≤ 0.05، **P ≤ 0.001، ***P ≤ 0.0001.
په ټیټ دوز (0.1X) کې، د لاروا د بدن وزن د ټرای فلوکسیسټروبین سره 60٪، د مینکوزیب سره 49٪، د مایکلوبوتانیل سره 48٪، او د پیریتیسټروبین سره 46٪ کم شو (انځور 1a). کله چې د ساحې دوز نیمایي (0.5X) سره مخ شو، د مینکوزیب لاروا د بدن وزن 86٪، د پیریتیسټروبین 52٪ او د ټرای فلوکسیسټروبین 50٪ کم شو (انځور 1b). د مینکوزیب بشپړ ساحې دوز (1X) د لاروا وزن 82٪، د پیریتیسټروبین 70٪، او ټرای فلوکسیسټروبین، مایکلوبوتانیل او سنګارډ نږدې 30٪ کم کړ (انځور 1c).
د لاروا په هغو کې چې د مینکوزیب درملنې شوي ګرده خوړل شوي وو، د مړینې کچه تر ټولو لوړه وه، ورپسې د پیریتیوسټروبین او ټرای فلوکسیسټروبین راځي. د مینکوزیب او پیریتوسیلین د زیاتیدونکي خوراک سره د مړینې کچه لوړه شوه (انځور 2؛ جدول 2). په هرصورت، د جوارو د بورونکو مړینه یوازې یو څه زیاته شوه ځکه چې د ټرای فلوکسیسټروبین غلظت زیات شو؛ سایپروډینیل او کیپتان د کنټرول درملنې په پرتله د مړینې کچه د پام وړ نه ده لوړه کړې.
د بورر مچ لاروا د مړینې کچه د شپږو مختلفو فنګس وژونکو سره په انفرادي ډول د ګرده خوړلو وروسته پرتله شوه. مانکوزیب او پینټوپیرامایډ د جوارو د میګوټونو سره د خولې تماس ته ډیر حساس وو (GLM: χ = 29.45، DF = 20، P = 0.0059) (کرښه، سلوپ = 0.29، P < 0.001؛ سلوپ = 0.24، P < 0.00)).
په اوسط ډول، په ټولو درملنو کې، 39.05٪ ناروغان ښځینه او 60.95٪ نارینه وو. د کنټرول درملنې په منځ کې، د ښځو تناسب په ټیټ دوز (0.1X) او نیم دوز (0.5X) مطالعاتو کې 40٪ و، او په ساحه کې دوز (1X) مطالعاتو کې 30٪ و. د 0.1X دوز کې، د ګرده تغذیه شوي لاروا په منځ کې چې د مینکوزیب او مایکلوبوتانیل سره درملنه شوي، 33.33٪ لویان ښځینه وو، 22٪ لویان ښځینه وو، 44٪ لویان لاروا ښځینه وو، 44٪ لویان لاروا ښځینه وو. ښځینه، 41٪ لویان لاروا ښځینه وو، او کنټرولونه 31٪ وو (انځور 3a). د 0.5 ځله دوز سره، د مینکوزیب او پیریتیوسټروبن ګروپ کې د لویانو چینجي 33٪ ښځینه وې، 36٪ په ټرایفلوکسایسټروبن ګروپ کې، 41٪ په مایکلوبوتانیل ګروپ کې، او 46٪ په سایپروسټروبن ګروپ کې. دا شمیره په ګروپ کې 53٪ وه. په کیپتان ګروپ کې او 38٪ په کنټرول ګروپ کې (انځور 3b). د 1X دوز سره، د مینکوزیب ګروپ 30٪ ښځې وې، د پیریتیوسټروبن ګروپ 36٪، د ټرایفلوکسایسټروبن ګروپ 44٪، د مایکلوبوتانیل ګروپ 38٪، د کنټرول ګروپ 50٪ ښځې وې - 38.5٪ (انځور 3c).
د لاروا مرحلې فنګس وژونکو سره د تماس وروسته د ښځینه او نارینه بوررونو سلنه. (a) ټیټ خوراک (0.1X). ​​(b) نیم خوراک (0.5X). (c) د ساحې خوراک یا بشپړ خوراک (1X).
د ۱۶S ترتیب تحلیل ښودلې چې د باکتریا ګروپ د لاروا ترمنځ توپیر درلود چې د مینکوزیب درملنې شوي ګرده سره تغذیه شوي او د غیر درملنې شوي ګرده سره تغذیه شوي (انځور ۴a). د هغو لاروا مایکروبیل شاخص چې د ګرده سره تغذیه شوي د لاروا په پرتله لوړ و چې د مینکوزیب درملنې شوي ګرده سره تغذیه شوي (انځور ۴b). که څه هم د ډلو ترمنځ د بډایتوب لیدل شوی توپیر په احصایوي ډول د پام وړ نه و، دا د هغو لاروا په پرتله د پام وړ ټیټ و چې د غیر درملنې شوي ګرده سره تغذیه شوي (انځور ۴c). نسبي کثرت ښودلې چې د کنټرول ګرده سره تغذیه شوي د لاروا مایکروبیوټا د مینکوزیب درملنې شوي لاروا په پرتله ډیر متنوع و (انځور ۵a). تشریحي تحلیل د کنټرول او مینکوزیب درملنې شوي نمونو کې د ۲۸ نسلونو شتون څرګند کړ (انځور ۵b). c د ۱۸S ترتیب په کارولو سره تحلیل هیڅ مهم توپیر نه دی څرګند کړی (ضمیمه شکل ۲).
د SAV پروفایلونه چې د 16S ترتیبونو پر بنسټ دي د شینن بډایتوب سره پرتله شوي او د فایلم په کچه مشاهده شوي بډایتوب سره. (a) د اصلي همغږۍ تحلیل (PCoA) د ټول مایکروبیل ټولنې جوړښت پراساس چې په غیر درملنې شوي ګرده تغذیه شوي یا کنټرول (نیلي) او مینکوزیب تغذیه شوي لاروا (نارنج) کې دي. د هر ډیټا نقطه یو جلا نمونه استازیتوب کوي. PCoA د څو متغیر t ویش د بری-کرټیس واټن په کارولو سره محاسبه شوی. بیضوي د 80٪ باور کچه استازیتوب کوي. (b) بکسپلاټ، خام شینن شتمني ډاټا (پوائنټونه) او ج. د لیدلو وړ شتمني. بکسپلاټونه د میډین لاین، انټرکوارټیل رینج (IQR)، او 1.5 × IQR (n = 3) لپاره بکسونه ښیې.
د لاروا د مایکروبیل ټولنو جوړښت چې د مینکوزیب درملنې شوي او غیر درملنې شوي ګرده باندې تغذیه شوي. (a) د مایکروبیل نسل نسبي کثرت په لاروا کې لوستل کیږي. (b) د پیژندل شوي مایکروبیل ټولنو د تودوخې نقشه. ډیلفټیا (د توپیر تناسب (OR) = 0.67، P = 0.0030) او سیوډوموناس (OR = 0.3، P = 0.0074)، مایکروباکټیریم (OR = 0.75، P = 0.0617) (OR = 1.5، P = 0.0060)؛ د تودوخې نقشې قطارونه د ارتباط واټن او اوسط ارتباط په کارولو سره کلستر شوي دي.
زموږ پایلې ښیي چې د تماس (مینکوزیب) او سیسټمیک (پیروسټروبن او ټرای فلوکسیسټروبن) فنګس وژونکو سره د شفاهي تماس، چې د ګل کولو پرمهال په پراخه کچه کارول کیږي، د وزن زیاتوالی او د جوارو لاروا مړینه د پام وړ کمه کړې. سربیره پردې، مینکوزیب د پریپوپل مرحلې په جریان کې د مایکروبیوم تنوع او بډایتوب د پام وړ کم کړی. مایکلوبوتانیل، یو بل سیسټمیک فنګس وژونکی، په ټولو دریو دوزونو کې د لاروا د بدن وزن زیاتوالی د پام وړ کم کړی. دا اغیزه په دویمه (پنځمه ورځ) او دریمه (اتمه ورځ) وخت ټکو کې څرګنده وه. برعکس، سایپروډینیل او کیپتان د کنټرول ګروپ په پرتله د وزن زیاتوالی یا بقا د پام وړ کم نه کړه. زموږ د پوهې له مخې، دا کار لومړی دی چې د مستقیم ګرده افشا کیدو له لارې د جوارو فصلونو د ساتنې لپاره کارول شوي مختلف فنګس وژونکو د ساحې نرخونو اغیزې مشخص کوي.
د کنټرول درملنې په پرتله د فنګس وژونکو ټولو درملنو د بدن وزن کې د پام وړ کمښت راوستی. مینکوزیب د لاروا د بدن وزن کې د اوسط کمښت سره ترټولو لوی تاثیر درلود 51٪، ورپسې پیریتیوسټروبن. په هرصورت، نورو مطالعاتو د لاروا مرحلو باندې د فنګس وژونکو د ساحې دوزونو منفي اغیزې راپور نه دي ورکړي 44. که څه هم ډیتیو کاربامیټ بایوسایدونه د ټیټ حاد زهریت لرونکي ښودل شوي 45، ایتیلین بیسډیتیو کاربامیټ (EBDCS) لکه مینکوزیب کولی شي یوریا ایتیلین سلفایډ ته تخریب شي. په نورو څارویو کې د هغې د میوټاجینک اغیزو ته په پام سره، دا تخریب محصول ممکن د لیدل شوي اغیزو لپاره مسؤل وي 46,47. پخوانیو مطالعاتو ښودلې چې د ایتیلین تیوریا جوړښت د لوړ تودوخې 48، د رطوبت کچه ​​49 او د محصول ذخیره کولو اوږدوالي 50 په څیر فکتورونو لخوا اغیزمن کیږي. د بایوسایدونو لپاره مناسب ذخیره کولو شرایط کولی شي دا اړخیزې اغیزې کمې کړي. سربیره پردې، د اروپا د خوړو خوندیتوب ادارې د پیریتیوپایډ د زهریت په اړه اندیښنه څرګنده کړې، کوم چې د نورو څارویو د هاضمي سیسټمونو لپاره سرطاني ښودل شوی 51.
د مینکوزیب، پیریتیوسټروبن، او ټرای فلوکسیسټروبن شفاهي اداره د جوارو د سوري کولو لاروا مړینه زیاتوي. برعکس، مایکلوبوتانیل، سیپروسایکلین او کیپتان د مړینې په اړه هیڅ اغیزه نه درلوده. دا پایلې د لاډورنر او نورو 52 سره توپیر لري، چا چې وښودله چې کیپتان د بالغ O. لیګناریا او اپیس میلیفیرا L. (هایمینوپټیرا، اپیسیډی) بقا د پام وړ کمه کړې. سربیره پردې، فنګس وژونکي لکه کیپتان او بوسکالیډ موندل شوي چې د لاروا مړینې لامل کیږي 52,53,54 یا د تغذیې چلند بدلوي 55. دا بدلونونه، په خپل وار، کولی شي د ګرده د تغذیې کیفیت او په نهایت کې د لاروا مرحلې انرژي لاسته راوړل اغیزمن کړي. د کنټرول ګروپ کې لیدل شوي مړینه د نورو مطالعاتو 56,57 سره مطابقت لري.
زموږ په کار کې لیدل شوي د نارینه وو د خوښې وړ جنس تناسب ممکن د ناکافي ملګرتیا او د ګل کولو پرمهال د خراب هوا شرایطو په څیر فکتورونو لخوا تشریح شي، لکه څنګه چې مخکې د ویسنز او بوش لخوا د O. cornuta لپاره وړاندیز شوی و. که څه هم زموږ په څیړنه کې ښځینه او نارینه د ملګرتیا لپاره څلور ورځې درلودې (هغه موده چې عموما د بریالي ملګرتیا لپاره کافي ګڼل کیږي)، موږ په قصدي ډول د فشار کمولو لپاره د رڼا شدت کم کړ. په هرصورت، دا تعدیل ممکن په غیر ارادي ډول د ملګرتیا پروسې سره مداخله وکړي 61. سربیره پردې، مچۍ د څو ورځو ناوړه هوا تجربه کوي، پشمول د باران او ټیټ تودوخې (<5 ° C)، کوم چې کولی شي د ملګرتیا بریالیتوب باندې منفي اغیزه هم وکړي 4,23.
که څه هم زموږ څېړنه په ټول لاروا مایکروبیوم تمرکز کوي، زموږ پایلې د باکتریایي ټولنو ترمنځ د احتمالي اړیکو په اړه بصیرت چمتو کوي چې ممکن د مچیو تغذیه او فنګس وژونکو سره د تماس لپاره مهم وي. د مثال په توګه، لاروا چې د مینکوزیب درملنې شوي ګرده تغذیه کړې وه د مایکروبیل ټولنې جوړښت او کثرت د لاروا په پرتله چې د درملنې پرته ګرده تغذیه شوي د پام وړ کم کړی و. په لاروا کې چې د درملنې پرته ګرده مصرفوي، د باکتریا ګروپونه پروټیوباکټیریا او ایکټینوباکټیریا غالب وو او په عمده توګه ایروبیک یا اختیاري ایروبیک وو. ډیلفټ باکتریا، معمولا د یوازیني مچیو ډولونو سره تړاو لري، د انټي بیوټیک فعالیت لپاره پیژندل کیږي، چې د ناروغیو په وړاندې احتمالي محافظتي رول په ګوته کوي. یو بل باکتریایي ډول، سیوډوموناس، په لاروا کې چې د درملنې پرته ګرده تغذیه شوي ډیر و، مګر په مینکوزیب درملنې شوي لاروا کې د پام وړ کم شوی و. زموږ پایلې د پخوانیو مطالعاتو ملاتړ کوي چې سیوډوموناس د O. bicornis35 او نورو یوازیني wasps34 کې د یو له خورا بډایه نسلونو څخه پیژندل کیږي. که څه هم د O. cornifrons په روغتیا کې د Pseudomonas د رول لپاره تجربوي شواهد نه دي مطالعه شوي، دا باکتریا ښودل شوې چې د بیټل Paederus fuscipes کې د محافظتي زهرجنو ترکیب ته وده ورکوي او په ویټرو 35، 65 کې د ارجینین میټابولیزم ته وده ورکوي. دا مشاهدې د O. cornifrons لاروا د پراختیا په وخت کې د ویروس او باکتریا دفاع کې احتمالي رول وړاندیز کوي. مایکروباکټیریم زموږ په څیړنه کې پیژندل شوی یو بل نسل دی چې د لوږې شرایطو لاندې د تور سرتیري مچ لاروا کې په لوړه شمیره کې شتون لري. په O. cornifrons لاروا کې، مایکروباکټیریم ممکن د فشار شرایطو لاندې د کولمو مایکروبایوم توازن او انعطاف کې مرسته وکړي. سربیره پردې، روډوکوکس په O. cornifrons لاروا کې موندل کیږي او د هغې د پاکولو وړتیاو لپاره پیژندل کیږي 67. دا نسل د A. florea په کولمو کې هم موندل کیږي، مګر په خورا ټیټ کثرت کې 68. زموږ پایلې د ډیری مایکروبیل ټیکا په اوږدو کې د ډیری جینیاتي بدلونونو شتون ښیې چې کولی شي په لاروا کې میټابولیک پروسې بدل کړي. په هرصورت، د O. cornifrons د فعال تنوع په اړه ښه پوهاوی ته اړتیا ده.
په لنډه توګه، پایلې ښیي چې مینکوزیب، پیریتیوسټروبین، او ټرای فلوکسیسټروبین د بدن وزن کم کړی او د جوارو د بور لاروا مړینه یې زیاته کړې ده. که څه هم د ګرده ګانو په اړه د فنګس وژونکو اغیزو په اړه اندیښنې مخ په زیاتیدو دي، د دې مرکباتو د پاتې میټابولایټونو اغیزو ښه پوهیدو ته اړتیا ده. دا پایلې د ګرده ګانو د مدغم مدیریت پروګرامونو لپاره سپارښتنو کې شامل کیدی شي چې بزګرانو سره مرسته کوي چې د میوو د ونو د ګل کولو دمخه او په جریان کې د فنګس وژونکو غوره کولو او د کارولو وخت بدلولو سره، یا د لږ زیان رسونکي بدیلونو کارولو هڅولو سره د ځینې فنګس وژونکو کارولو څخه ډډه وکړي. 36. دا معلومات د آفت وژونکو کارولو په اړه د سپارښتنو رامینځته کولو لپاره مهم دي، لکه د موجوده سپری پروګرامونو تنظیم کول او د فنګس وژونکو غوره کولو پرمهال د سپری وخت بدلول یا د لږ خطرناک بدیلونو کارولو ته وده ورکول. د جنس تناسب، د تغذیې چلند، د کولمو مایکروبیوم، او د جوارو د بورونکي وزن کمولو او مړینې لاندې مالیکولي میکانیزمونو باندې د فنګس وژونکو منفي اغیزو په اړه نورو څیړنو ته اړتیا ده.
په شکل ۱ او ۲ کې د سرچینې معلومات ۱، ۲ او ۳ د فګشیر معلوماتو ذخیره کې زیرمه شوي دي: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 او https://doi.org/10.6084/m9. figshare.24996233. په اوسني څیړنه کې تحلیل شوي ترتیبونه (انځورونه ۴، ۵) د NCBI SRA ذخیره کې د لاسرسي نمبر PRJNA1023565 لاندې شتون لري.
بوش، جي. او کیمپ، ډبلیو پي د کرنیزو فصلونو د ګرده افشاني کونکو په توګه د شاتو د مچیو د ډولونو پراختیا او تاسیس: د اوسمیا نسل مثال. (هایمینوپټیرا: میګاچیلیډی) او د میوو ونې. غویی. نټومور. سرچینه. 92، 3-16 (2002).
پارکر، ایم جی او نور. په نیویارک او پنسلوانیا کې د مڼو کروندګرو ترمنځ د ګرده افشانۍ طریقې او د بدیل ګرده افشانیانو نظرونه. تازه معلومات. کرنه. د خوړو سیسټمونه. ۳۵، ۱-۱۴ (۲۰۲۰).
کوچ آی.، لونسډورف ای ډبلیو، آرټز ډي آر، پیټس-سنګر ټي ایل او ریکټس ټي ایچ د اصلي مچیو په کارولو سره د بادامو د ګرده افشانۍ ایکولوژي او اقتصاد. جي. اقتصاد. نټومور. ۱۱۱، ۱۶-۲۵ (۲۰۱۸).
لي، اي.، هي، واي.، او پارک، واي.- ايل. د اقليمي بدلون اغېزې په ټراګوپان فینولوژي: د نفوسو د مدیریت لپاره اغېزې. پورته کېدل. بدلون ۱۵۰، ۳۰۵–۳۱۷ (۲۰۱۸).
آرټز، ډي آر او پیټس-سنګر، ټي ایل د دوو منظم شویو یوازینیو مچیو (اوسیمیا لیګناریا او میګاچائل روټونډاټا) د ځالې په چلند باندې د فنګس وژونکو او مرستندویه سپرې اغیز. PloS One 10، e0135688 (2015).
بووایس، ایس او نور. د کم زهرجن فصل فنګس وژونکی (فینبوکونازول) د نارینه د تولید کیفیت سیګنالونو سره مداخله کوي چې په پایله کې په وحشي یوازینیو مچیو کې د ملګرتیا بریالیتوب کموي. جي. ایپس. ایکولوژي. 59، 1596-1607 (2022).
سګولاسټرا ایف. او نور. نیونیکوټینایډ حشره وژونکي او د ارګوسټرول بایوسینتیسس د مچیو په دریو ډولونو کې د همغږۍ فنګس وژونکي مړینې مخه نیسي. د آفتونو کنټرول. ساینس. 73، 1236-1243 (2017).
کوهنمن جي جي، ګیلنګ جي، وان ډایک ایم ټي، فورډیس آر ایف او ډانفورت بي این سولیټري وایسپ لاروا د باکتریا تنوع بدلوي چې د ګرده لخوا د ډډ ځالې لرونکو مچیو اوسمیا کارنیفرون (میګاچیلیډی) ته چمتو کیږي. مخکینۍ. مایکرو ارګانیزم. ۱۳، ۱۰۵۷۶۲۶ (۲۰۲۳).
دھرمپال پی ایس، ډانفورت بی این او سټیفن ایس اے په تخمیر شوي ګرده کې د ایکټوسیمبیوټیک مایکرو ارګانیزمونه د یوازینۍ مچۍ د ودې لپاره هغومره مهم دي لکه څنګه چې پخپله ګرده. ایکولوژي. ارتقا. ۱۲. e۸۷۸۸ (۲۰۲۲).
کیلډر ایم، مانیسی ایل ایم، کیپوټو ایف او تالهایمر ایم. د مڼو په باغونو کې د قطارونو ترمنځ کښت د بیا تخم کولو ناروغیو کنټرول لپاره: د مایکروبیل شاخصونو پراساس د عملي اغیزمنتوب مطالعه. د نبات خاوره 357، 381-393 (2012).
مارټین پي ایل، کراوچیک ټي.، خدادادي ایف.، اچیموویچ ایس جي او پیټر کې اې د متحده ایالاتو په مینځ کې د مڼو ترخه خرابي: د لامل لرونکو ډولونو ارزونه او د سیمه ایزو هوا شرایطو او د کښت حساسیت اغیزه. فایټوپیتولوژي 111، 966-981 (2021).
کولن ایم جی، ټامپسن ایل جي، کارولان جي کی، سټوټ جي کی. او سټینلي ډي اے فنګسي وژونکي، واښه وژونکي او مچۍ: د موجوده څیړنو او میتودونو سیستماتیک بیاکتنه. PLoS One 14، e0225743 (2019).
پیلینګ، ای ډي او جیپسن، پي سي د شاتو مچیو (اپیس میلیفیرا) باندې د ای بي آی فنګسایډونو او پیریترایډ حشراتو ضد درملو ترکیبي اغیزې. ساینس ته آفتونه. 39، 293-297 (1993).
موسن، ای سي، لوپیز، جي ای او پینګ، سي وائی د شاتو د مچیو د لاروا اپیس میلیفیرا ایل (هایمینوپټیرا: اپیډای) په وده او پراختیا باندې د ټاکل شویو فنګس وژونکو اغیز. چهارشنبه. نټوموره. ۳۳، ۱۱۵۱-۱۱۵۴ (۲۰۰۴).
وان ډایک، ایم.، مولن، ای.، ویکسټیډ، ډي.، او مک ارټ، ایس. د ونو په باغونو کې د ګرده ګانو د ساتنې لپاره د آفت وژونکو کارولو لپاره د پریکړې لارښود (کورنیل پوهنتون، ۲۰۱۸).
ایواساکي، جي ایم او هوګینډورن، کې. د غیر آفت وژونکو سره د مچیو مخامخ کیدل: د میتودونو او راپور شوي پایلو بیاکتنه. کرنه. ایکوسیستم. چهارشنبه. ۳۱۴، ۱۰۷۴۲۳ (۲۰۲۱).
کوپیت اې ایم، کلینګر ای، کاکس-فوسټر ډي ایل، رامیرز آر اے. او پیټس-سنګر ټي ایل د اوسمیا لیګناریا (هایمینوپټیرا: میګاچیلیډی) لاروا پراختیا باندې د اکمالاتو ډول او د آفت وژونکو سره د تماس اغیز. چهارشنبه. نټومورف. ۵۱، ۲۴۰-۲۵۱ (۲۰۲۲).
کوپټ اې ایم او پیټس-سنګر ټي ایل د خالي ځالې مچیو ته د آفت وژونکو د تماس لارې. چهارشنبه. نټومورف. ۴۷، ۴۹۹-۵۱۰ (۲۰۱۸).
پان، این ټي او نور. د جاپاني باغ د بالغو مچیو (اوسیمیا کارنیفرون) کې د آفت وژونکو زهرجنیت ارزولو لپاره د بایو ازموینې یو نوی پروتوکول. ساینس. راپورونه 10، 9517 (2020).