د کوچنیو آبي تیدپولونو لپاره د سوداګریزو سایپر میترین چمتووالي مړینه او زهریت

دې مطالعې د سوداګریزو توکو وژونکې، فرعي وژونکې او زهرجنیت ارزولیسایپر میتریند انوران ټډپولونو لپاره فورمولونه. په حاد ازموینه کې، د 100-800 μg/L غلظت د 96 ساعتونو لپاره ازمول شوی. په اوږدمهاله ازموینه کې، د سایپرمیترین طبیعي غلظت (1، 3، 6، او 20 μg/L) د مړینې لپاره ازمول شوی، وروسته د مایکرو نیوکلیوس ازموینه او د 7 ورځو لپاره د سره وینې حجرو اټومي غیر معمولي حالتونه. د ټډپولونو لپاره د سوداګریز سایپرمیترین فورمولیشن LC50 273.41 μg L−1 و. په اوږدمهاله ازموینه کې، ترټولو لوړ غلظت (20 μg L−1) د 50٪ څخه ډیر مړینې پایله درلوده، ځکه چې دا د ټډپولونو نیمایي برخه یې ووژله. د مایکرو نیوکلیوس ازموینې په 6 او 20 μg L−1 کې د پام وړ پایلې وښودلې او ډیری اټومي غیر معمولي حالتونه کشف شول، چې دا په ګوته کوي چې د سایپرمیترین سوداګریز فورمول د P. gracilis په وړاندې جینټوکسیک ظرفیت لري. سایپر میترین د دې نوع لپاره یو لوړ خطر دی، چې دا په ګوته کوي چې دا کولی شي ډیری ستونزې رامینځته کړي او په لنډ او اوږد مهال کې د دې ایکوسیستم متحرکات اغیزمن کړي. له همدې امله، دا پایله کیدی شي چې سوداګریز سایپر میترین فورمولونه په P. gracilis باندې زهرجن اغیزې لري.
د کرنیزو فعالیتونو د دوامداره پراختیا او د شدید استعمال له املهد آفتونو کنټرولاقدامات، آبي حیوانات په مکرر ډول د آفت وژونکو سره مخ کیږي 1,2. د کرنیزو ځمکو ته نږدې د اوبو سرچینو ککړتیا کولی شي د غیر هدف لرونکي ژوندیو موجوداتو لکه امفیبیان وده او بقا اغیزمنه کړي.
د چاپیریال د معیارونو په ارزونه کې امفیبیان په زیاتیدونکي توګه مهم کیږي. انوران د چاپیریال ککړونکو ښه بایو انډیکټران ګڼل کیږي ځکه چې د دوی ځانګړي ځانګړتیاوې لکه د ژوند پیچلي دورې، د لاروا د ودې چټکه کچه، د ټرافیک حالت، د نفوذ وړ پوستکي 10,11، د تکثیر لپاره په اوبو پورې تړلتیا 12 او غیر خوندي هګۍ 11,13,14. د اوبو کوچنی چونګښه (Physalaemus gracilis)، چې معمولا د ژړونکي چونګښې په نوم پیژندل کیږي، د آفت وژونکو ککړتیا 4,5,6,7,15 د بایو انډیکټران ډول ښودل شوی. دا نوعه په ارجنټاین، یوراګوای، پاراګوای او برازیل کې په ولاړو اوبو، خوندي سیمو یا متغیر استوګنځایونو سیمو کې موندل کیږي 1617 او د IUCN طبقه بندي لخوا د هغې د پراخه ویش او د مختلفو استوګنځایونو زغم له امله باثباته ګڼل کیږي 18.
د سایپرمیترین سره د تماس وروسته په امفیبیانو کې فرعي وژونکي اغیزې راپور شوي، په شمول د ټډپولونو کې چلند، مورفولوژیکي او بایو کیمیکل بدلونونه 23,24,25، د مړینې او میټامورفوسس وخت بدل شوی، انزایمیک بدلونونه، د هګیو د بریالیتوب کمیدل 24,25، هایپر فعالیت 26، د کولینسټریس فعالیت مخنیوی 27 او د لامبو فعالیت کې بدلونونه 7,28. په هرصورت، په امفیبیانو کې د سایپرمیترین د جینټوکسیک اغیزو مطالعات محدود دي. له همدې امله، دا مهمه ده چې د سایپرمیترین په وړاندې د انوران ډولونو حساسیت ارزونه وشي.
د چاپیریال ککړتیا د امفیبیانو په نورماله وده او پرمختګ اغیزه کوي، مګر تر ټولو جدي منفي اغیزه د آفت وژونکو سره د تماس له امله رامینځته شوي DNA ته جینیاتي زیان دی13. د وینې حجرو مورفولوژي تحلیل د ککړتیا او وحشي ډولونو ته د مادې احتمالي زهرجنیت یو مهم بایو شاخص دی29. د مایکرو نیوکلیوس ازموینه په چاپیریال کې د کیمیاوي موادو د جینټوکسیکیت ټاکلو لپاره یو له خورا عام کارول شوي میتودونو څخه دی30. دا یو ګړندی، مؤثر او ارزانه میتود دی چې د ژوندیو موجوداتو لکه امفیبیانو کیمیاوي ککړتیا ښه شاخص دی31,32 او کولی شي د جینټوکسیک ککړونکو سره د تماس په اړه معلومات چمتو کړي33.
د دې مطالعې موخه دا وه چې د مایکرونیوکلیوس ازموینې او ایکولوژیکي خطر ارزونې په کارولو سره کوچني آبي ټډپولونو ته د سوداګریزو سایپرمیترین فورمولونو زهرجن ظرفیت ارزونه وکړي.
د ازموینې د حاد دورې په جریان کې د سوداګریزو سایپرمیترین مختلف غلظت سره مخ شوي د P. gracilis tadpoles مجموعي مړینې (٪).
د اوږدمهاله ازموینې په جریان کې د سوداګریزو سایپرمیترین مختلف غلظت سره مخ شوي د P. gracilis tadpoles مجموعي مړینې (٪).
د مړینې لوړه کچه د سایپرمیترین د مختلفو غلظتونو (6 او 20 μg/L) سره مخ شوي په امفیبیانو کې د جینټوکسیک اغیزو پایله وه، لکه څنګه چې د مایکرو نیوکلی (MN) شتون او په اریتروسایټونو کې د اټومي غیر معمولي والي لخوا ثبوت شوې. د MN جوړښت په مایټوسس کې غلطۍ په ګوته کوي او د مایکروټیوبونو سره د کروموزومونو ضعیف تړلو سره تړاو لري، د پروټین کمپلیکسونو کې نیمګړتیاوې چې د کروموزوم جذب او لیږد لپاره مسؤل دي، د کروموزوم جلا کولو کې غلطۍ او د DNA زیان ترمیم کې غلطۍ 38,39 او ممکن د آفت وژونکو هڅول شوي اکسیډیټیو فشار سره تړاو ولري40,41. نور غیر معمولي والي په ټولو ارزول شوي غلظتونو کې لیدل شوي. د سایپرمیترین غلظت زیاتیدل په ترتیب سره په اریتروسایټونو کې اټومي غیر معمولي والي 5% او 20% په ټیټ (1 μg/L) او لوړ (20 μg/L) دوزونو کې زیات کړی. د مثال په توګه، د یو نوع په DNA کې بدلونونه کولی شي د لنډمهاله او اوږدمهاله بقا لپاره جدي پایلې ولري، چې پایله یې د نفوس کمښت، د زیږون فټنس بدلول، نسل ورکول، د جینیاتي تنوع له لاسه ورکول، او د مهاجرت نرخونه بدل شوي. دا ټول عوامل کولی شي د نوعو بقا او ساتنه اغیزمنه کړي 42,43. د اریترویډ غیر معمولي جوړښت ممکن د سایټوکینیسز کې د بندیدو نښه وي، چې پایله یې د غیر معمولي حجرو ویش (باین نیوکلیټیډ اریترویډز) 44,45 وي؛ څو لوب شوي نیوکلی د څو لوبونو سره د اټومي غشا پروتروسونه دي 46، پداسې حال کې چې نور اریترویډ غیر معمولي ممکن د DNA امپلیفیکیشن سره تړاو ولري، لکه د اټومي پښتورګو/بلبونه 47. د ان نیوکلیټیډ اریترویډز شتون ممکن د اکسیجن د لیږد خرابوالی په ګوته کړي، په ځانګړې توګه په ککړو اوبو کې 48,49. اپوپټوسس د حجرو مړینه په ګوته کوي 50.
نورو مطالعاتو د سایپرمیترین جینوټوکسیک اغیزې هم ښودلې دي. کابا او نور ۵۱ د سایپرمیترین لوړ غلظت (۵۰۰۰ او ۱۰۰۰۰ μg L−۱) سره د ۹۶ ساعتونو لپاره د تماس وروسته په اوډونټوفرینوس امریکانس حجرو کې د مایکرو نیوکلی او اټومي بدلونونو لکه باین نیوکلییټ شوي حجرو او اپوپټوټیک حجرو شتون وښود. په P. biligonigerus52 او Rhinella arenarum53 کې د سایپرمیترین هڅول شوی اپوپټوسس هم کشف شو. دا پایلې وړاندیز کوي چې سایپرمیترین د اوبو ژوندی موجوداتو په لړۍ کې جینوټوکسیک اغیزې لري او دا چې MN او ENA ارزونه ممکن په امفیبیانو باندې د فرعي وژونکو اغیزو شاخص وي او ممکن د اصلي ډولونو او وحشي نفوس لپاره پلي شي چې د زهرجنو موادو سره مخ کیږي12.
د سایپر میترین سوداګریز فورمولونه د چاپیریال لپاره لوړ خطر رامینځته کوي (دواړه حاد او اوږدمهاله)، د مرکزي دفترونو سره د متحده ایالاتو د چاپیریال ساتنې ادارې (EPA) کچه 54 څخه لوړه ده چې ممکن په چاپیریال کې شتون ولري نو په نوعو منفي اغیزه وکړي. د اوږدمهاله خطر ارزونې کې، د مړینې لپاره NOEC 3 μg L−1 و، دا تاییدوي چې په اوبو کې موندل شوي غلظت ممکن د نوعو لپاره خطر رامینځته کړي 55. د R. ارینارم لاروا لپاره وژونکی NOEC د انډوسلفن او سایپر میترین مخلوط سره مخ کیدو لپاره د 168 ساعتونو وروسته 500 μg L−1 و؛ دا ارزښت د 336 ساعتونو وروسته 0.0005 μg L−1 ته راټیټ شو. لیکوالان ښیې چې څومره اوږدمهاله افشا کول، هغومره غلظت کم وي چې نوعو ته زیان رسوي. دا هم مهمه ده چې روښانه شي چې د NOEC ارزښتونه د ورته افشا کیدو وخت کې د P. gracilis په پرتله لوړ وو، دا په ګوته کوي چې د سایپر میترین سره د نوعو غبرګون د نوعو لپاره ځانګړی دی. سربیره پردې، د مړینې له پلوه، د سایپرمیترین سره د تماس وروسته د P. gracilis CHQ ارزښت 64.67 ته ورسید، کوم چې د متحده ایالاتو د چاپیریال ساتنې ادارې لخوا ټاکل شوي حوالې ارزښت څخه لوړ دی54، او د R. arenarum لاروا CHQ ارزښت هم د دې ارزښت څخه لوړ و (CHQ > 388.00 د 336 ساعتونو وروسته)، دا په ګوته کوي چې مطالعه شوي حشره وژونکي د څو امفیبیانو ډولونو لپاره لوړ خطر رامینځته کوي. په پام کې نیولو سره چې P. gracilis د میټامورفوسس بشپړولو لپاره نږدې 30 ورځو ته اړتیا لري56، دا پایله کیدی شي چې د سایپرمیترین مطالعه شوي غلظت ممکن د نفوس کمیدو کې مرسته وکړي د اخته اشخاصو مخه ونیسي چې په کم عمر کې بالغ یا د زیږون مرحلې ته ننوځي.
د مایکرو نیوکلی او نورو اریتروسایټ اټومي غیر معمولي ناروغیو د محاسبې شوي خطر ارزونې کې، د CHQ ارزښتونه له 14.92 څخه تر 97.00 پورې وو، چې دا په ګوته کوي چې سایپرمیترین د P. gracilis لپاره حتی په خپل طبیعي استوګنځي کې د جینوټوکسیک احتمالي خطر درلود. د مړینې په پام کې نیولو سره، د P. gracilis لپاره د زغم وړ زینوبیوټکسیک مرکباتو اعظمي غلظت 4.24 μg L−1 و. په هرصورت، د 1 μg/L په څیر ټیټ غلظت هم د جینوټوکسیک اغیزې ښودلې. دا حقیقت ممکن د غیر معمولي اشخاصو شمیر کې زیاتوالي لامل شي57 او د دوی په استوګنځایونو کې د ډولونو پراختیا او تکثیر اغیزه وکړي، چې د امفیبیانو نفوس کې کمښت لامل کیږي.
د حشره وژونکو سایپر میترین سوداګریز فورمولونه د P. gracilis لپاره لوړ حاد او اوږدمهاله زهرجنیت ښودلی. د مړینې لوړه کچه لیدل شوې، احتمال د زهرجن اغیزو له امله، لکه څنګه چې د مایکرو نیوکلی او اریتروسایټ اټومي غیر معمولي شتون لخوا ثبوت شوی، په ځانګړي توګه د سیرټ شوي نیوکلی، لوبډ نیوکلی، او ویسکولر نیوکلی. سربیره پردې، مطالعه شوي ډولونه د چاپیریال خطرونه زیات شوي، دواړه حاد او اوږدمهاله. دا معلومات، زموږ د څیړنې ډلې لخوا د پخوانیو مطالعاتو سره یوځای، ښودلې چې حتی د سایپر میترین مختلف سوداګریز فورمولونه لاهم د اسیتیلچولینیسټریس (AChE) او بټیریلچولینیسټریس (BChE) فعالیتونو او اکسیډیټیو فشار 58 کمښت لامل شوی، او په P. gracilis کې د لامبو فعالیت او شفاهي خرابوالي 59 کې بدلونونه رامینځته کړي، دا په ګوته کوي چې د سایپر میترین سوداګریز فورمولونه د دې نوعې لپاره لوړ وژونکي او فرعي وژونکي زهرجنیت لري. هارټمن او نور. 60 وموندله چې د سایپر میترین سوداګریز فورمولونه د P. gracilis او د ورته جینس بل ډول (P. cuvieri) لپاره د نهو نورو آفت وژونکو په پرتله خورا زهرجن وو. دا وړاندیز کوي چې د چاپیریال ساتنې لپاره د سایپرمیترین قانوني تصویب شوي غلظت ممکن د لوړې مړینې او د نفوس اوږدمهاله کمښت لامل شي.
د امفیبیانو لپاره د آفت وژونکو د زهري والي د ارزونې لپاره نورو مطالعاتو ته اړتیا ده، ځکه چې په چاپیریال کې موندل شوي غلظت ممکن د لوړې مړینې لامل شي او د P. gracilis لپاره احتمالي خطر رامینځته کړي. د امفیبیانو ډولونو په اړه څیړنې باید وهڅول شي، ځکه چې د دې ژوندی موجوداتو په اړه معلومات کم دي، په ځانګړي توګه د برازیل ډولونو په اړه.
د زهرجنو موادو اوږدمهاله ازموینه د جامد شرایطو لاندې د ۱۶۸ ساعتونو (۷ ورځو) لپاره دوام وکړ او فرعي وژونکي غلظتونه دا وو: ۱، ۳، ۶ او ۲۰ μg ai L−۱. په دواړو تجربو کې، د درملنې په هر ګروپ کې ۱۰ ټډپولونه د شپږو نقلونو سره ارزول شوي، چې په هر غلظت کې ټولټال ۶۰ ټډپولونه وو. په عین حال کې، یوازې د اوبو درملنه د منفي کنټرول په توګه کار کوي. هر تجربوي ترتیب د یو تعقیم شیشې ډش څخه جوړ و چې د ۵۰۰ ملی لیتر ظرفیت او د ۵۰ ملی لیتر محلول لپاره د ۱ ټډپول کثافت درلود. فلاسک د تبخیر مخنیوي لپاره د پولی ایتیلین فلم سره پوښل شوی و او په دوامداره توګه هوا ورکول کیده.
اوبه په کیمیاوي ډول تحلیل شوې ترڅو د افت وژونکو غلظت په 0، 96، او 168 ساعتونو کې مشخص شي. د سابین او نورو په وینا. 68 او مارټینز او نورو. 69، تحلیلونه د سانټا ماریا فدرالي پوهنتون د افت وژونکو تحلیل لابراتوار (LARP) کې د ګاز کروماتګرافي په کارولو سره ترسره شوي چې د درې ګوني کواډروپول ماس سپیکٹرومیټري سره یوځای شوي (ویرین ماډل 1200، پالو الټو، کالیفورنیا، متحده ایالات). په اوبو کې د افت وژونکو کمیتي ټاکل د اضافي موادو په توګه ښودل شوي (جدول SM1).
د مایکرونیوکلیوس ټیسټ (MNT) او سره حجرو د اټومي غیر معمولي ازموینې (RNA) لپاره، د هر درملنې ګروپ څخه 15 ټډپولونه تحلیل شول. ټډپولونه د 5٪ لیډوکاین (50 ملی ګرامه g-170) سره بې هوښه شول او د وینې نمونې د هیپرین شوي سرنجونو په کارولو سره د زړه د پنکچر له لارې راټولې شوې. د وینې نښې په جراثیمي مایکروسکوپ سلایډونو کې چمتو شوې، په هوا کې وچې شوې، د 2 دقیقو لپاره د 100٪ میتانول (4 °C) سره تنظیم شوې، او بیا د 10٪ ګییمسا محلول سره د 15 دقیقو لپاره په تیاره کې رنګ شوې. د پروسې په پای کې، سلایډونه د اضافي داغ لرې کولو لپاره د اوبو سره مینځل شوي او د خونې په حرارت کې وچ شوي.
د هر ټډپول څخه لږ تر لږه ۱۰۰۰ RBCs د ۱۰۰× مایکروسکوپ په کارولو سره تحلیل شوي ترڅو د MN او ENA شتون معلوم کړي. د ټډپولونو څخه ټولټال ۷۵،۷۹۶ RBCs د سایپرمیترین غلظت او کنټرول په پام کې نیولو سره ارزول شوي. جینوټوکسیسیټي د کاراسکو او نورو میتود سره سم تحلیل شوې. او فینچ او نورو.۳۸،۷۲ د لاندې اټومي زخمونو فریکونسي ټاکلو سره: (۱) انوکلییټ حجرې: پرته له نیوکلیایي حجرې؛ (۲) اپوپټوټیک حجرې: د اټومي ټوټې کیدو، د پروګرام شوي حجرو مړینه؛ (۳) باینوکلییټ حجرې: د دوه نیوکلیایي حجرو سره حجرې؛ (۴) اټومي غوټۍ یا بلب حجرې: د اټومي غشا د کوچني پروټروژن سره نیوکلی لرونکي حجرې، د مایکرو نیوکلیایي سره ورته بلبونه؛ (۵) کیریولیز شوي حجرې: د داخلي موادو پرته د نیوکلیوس یوازې خاکه لرونکي حجرې؛ (۶) نوچ شوي حجرې: د نیوکلی سره حجرې چې په خپل شکل کې څرګند درزونه یا نوچونه لري، چې د پښتورګو په شکل نیوکلیایي هم بلل کیږي؛ (۷) لوبل شوي حجرات: هغه حجرات چې د پورته ذکر شویو ویسیکلونو څخه لوی هستوي پروټروسونه لري؛ او (۸) مایکرو حجرات: هغه حجرات چې متمرکز هستوي او کم شوي سایتوپلازم لري. بدلونونه د منفي کنټرول پایلو سره پرتله شوي.
د حاد زهرجنیت ازموینې پایلې (LC50) د GBasic سافټویر او TSK-Trimmed Spearman-Karber میتود 74 په کارولو سره تحلیل شوې. د اوږدمهاله ازموینې معلومات د غلطۍ نورمالیت (شاپیرو-ویلکس) او د تغیراتو یووالي (بارټلیټ) لپاره دمخه ازمول شوي وو. پایلې د تغیراتو د یو اړخیز تحلیل (ANOVA) په کارولو سره تحلیل شوې. د ټوکي ازموینه د دوی ترمنځ د معلوماتو پرتله کولو لپاره کارول شوې وه، او د ډنیټ ازموینه د درملنې ډلې او منفي کنټرول ډلې ترمنځ د معلوماتو پرتله کولو لپاره کارول شوې وه.
د LOEC او NOEC معلومات د ډنیټ ازموینې په کارولو سره تحلیل شول. احصایوي ازموینې د Statistica 8.0 سافټویر (StatSoft) په کارولو سره د 95٪ اهمیت کچې سره ترسره شوې (p < 0.05).