دا څېړنه ښيي چې د ریزوفیر سمبیوټیک فنګس *کوساکونیا اوریزیفیلا* NP19 چې د وریجو له ریښو څخه جلا شوی د نبات د ودې هڅوونکی بایوپیستیک او بایوپیستیک دی چې د *پیریکولیریا اوریزای* له امله د وریجو د چاودنې کنټرول لپاره دی. د کاو ډاوک مالي 105 (KDML105) ډول د یاسمین وریجو د تخمونو په تازه پاڼو باندې د ان ویټرو تجربې ترسره شوې. پایلو وښودله چې NP19 په مؤثره توګه د *پیریکولیریا اوریزای* کونیډیا د ټوکیدنې مخه نیولې. *پیریکولیریا اوریزای* انتان د درملنې په دریو مختلفو شرایطو کې مخنیوی شوی و: لومړی، وریجې د NP19 سره مستعمره شوې او د *پیریکولیریا اوریزای* کونیډیا سره واکسین شوې؛ دوهم، د NP19 او *پیریکولیریا اوریزای* کونیډیا مخلوط په پاڼو باندې تطبیق شو؛
د ریزوسفیر باکتریا *کوساکونیا اوریزیفیلا* NP1914د وریجو له ریښو څخه جلا شوی و (*اوریزا سیټیوا* L. cv. RD6). *کوساکونیا اوریزیفیلا* NP19 د نبات د ودې هڅونکي ځانګړتیاوې لري، په شمول د نایتروجن فکسیشن، انډولیاسیټیک اسید (IAA) تولید، او د فاسفیټ محلول. په زړه پورې خبره دا ده چې *کوساکونیا اوریزیفیلا* NP19 چیټیناز تولیدوي۱۴.د KDML105 وریجو تخمونو ته د *کوساکونیا اوریزیفیلا* NP19 کارول د وریجو د چاودنې وروسته د وریجو ژوندي پاتې کیدل ښه کړي دي. د دې څیړنې هدف دا دی چې (i) د وریجو د چاودنې په وړاندې د *کوساکونیا اوریزیفیلا* NP19 د مخنیوي میکانیزم روښانه کړي او (ii) د وریجو د چاودنې په کنټرول کې د *کوساکونیا اوریزیفیلا* NP19 اغیز وڅیړي.
مغذي مواد د نبات په وده او پرمختګ کې مهم رول لوبوي، د مختلفو مایکروبیل ناروغیو کنټرولولو لپاره د فکتورونو په توګه کار کوي. د نبات معدني تغذیه د هغې د ناروغیو مقاومت، مورفولوژیکي یا نسج ځانګړتیاوې، او ویروس، یا د ناروغیو په وړاندې د ژوندي پاتې کیدو وړتیا ټاکي. فاسفورس کولی شي د فینولیک مرکباتو ترکیب زیاتولو سره د وریجو د چاودنې شدت ورو کړي او کم کړي. پوټاشیم عموما د وریجو د ډیری ناروغیو پیښې کموي، لکه د وریجو چاودنه، د باکتریا د پاڼو ځای، د پاڼو د پوښ ځای، د ډډ خرابیدل، او د پاڼو ځای. د پیرینوډ لخوا یوې مطالعې ښودلې چې د لوړ پوټاشیم سرې کولی شي د وریجو د فنګسي ناروغیو پیښې کمې کړي او حاصلات زیات کړي. ډیری مطالعاتو ښودلې چې د سلفر سرې کولی شي د فنګسي ناروغیو په وړاندې د فصل مقاومت ښه کړي.27ډیر مګنیزیم (د کلوروفیل یوه برخه) کولی شي د وریجو د چاودیدو لامل شي.21زنک کولی شي په مستقیم ډول رنځوران ووژني، په دې توګه د ناروغۍ شدت کموي.22ساحوي تجربو وښودله چې که څه هم د کروندو په خاوره کې د فاسفورس، پوټاشیم، سلفر او جست غلظت د لوښو په پرتله لوړ و، خو بیا هم د وریجو بلاسټ د وریجو د پاڼو له لارې خپریږي. د خاورې مغذي مواد ممکن د وریجو د بلاسټ په کنټرول کې ډیر اغیزمن نه وي، ځکه چې نسبي رطوبت او تودوخه د قوي ناروغۍ د اخته کیدو لپاره نامناسب دي.
په ساحوي ازموینو کې، سټینوټروفوموناس مالټوفیلیا، پی. ډیسپرسا، ژانتوموناس ساچاري، برخولډیریا ملټیوورانس، برخولډیریا ډیفوسا، برخولډیریا ویتنامیینسیس او سي. ګلیم په ټولو درملنو کې کشف شول. سټینوټروفوموناس مالټوفیلیا د غنمو، اوربشو، بادرنګ، جوار او کچالو له ریزوسفیر څخه جلا شوی او بایو کنټرول یې ښودلی دی.فعالیتد کولیټوټریکم نیمفای په وړاندې.28 سربیره پردې، د P. dispersa راپور ورکړل شوی چې د تور رنګ په وړاندې اغیزمن دیخرابېدلخواږه کچالو.29 سربیره پردې، د Xanthomonas sacchari R1 ډول د وریجو د چاودیدو او د بورخولډیریا له امله رامینځته شوي پانیکل روټ پروړاندې ضد فعالیت ښودلی دی.ګلومي.۳۰د بورکولډیریا اوریزا NP19 کولی شي د ټوکیدنې پرمهال د وریجو نسج سره سمبیوټیک اړیکه رامینځته کړي او د وریجو د ځینو ډولونو لپاره یو سیمه ایز سمبیوټیک فنګس شي. پداسې حال کې چې د خاورې نور باکتریا کولی شي د کښت کولو وروسته وریجې مستعمره کړي، د بلاسټ فنګس NP19، یوځل مستعمره شي، د دې ناروغۍ په وړاندې د وریجو د دفاعي میکانیزم کې ډیری فکتورونه اغیزمن کوي. NP19 نه یوازې د P. oryzae وده له 50٪ څخه ډیر فشاروي (په آنلاین ضمیمه کې ضمیمه جدول S1 وګورئ)، بلکه په پاڼو کې د چاودیدونکو ټپونو شمیر هم کموي او د NP19 (RBf، RFf-B، او RBFf-B) سره د وریجو د واکسین شوي یا مستعمره شوي حاصلات زیاتوي (شکل S3).
د پیریکولریا اوریزا فنګس، چې د نبات د چاودنې لامل کیږي، یو هیمیتروفیک فنګس دی چې د انتان پرمهال د کوربه نبات څخه مغذي موادو ته اړتیا لري. نباتات د فنګسي انتان د مخنیوي لپاره د غبرګون وړ اکسیجن ډولونه (ROS) تولیدوي؛ په هرصورت، پیریکولریا اوریزا د کوربه تولید شوي ROS سره د مقابلې لپاره مختلفې ستراتیژۍ کاروي.31داسې ښکاري چې پیرو اکسیډیزونه د ناروغۍ په مقاومت کې رول لوبوي، په شمول د حجرو دیوال پروټینونو کراس لینک کول، د زایلم دیوالونو ضخامت، د ROS تولید، او د هایدروجن پیرو اکسایډ بې طرفه کول.32د انټي اکسیډنټ انزایمونه ممکن د ROS د پاکولو لپاره د ځانګړي سیسټم په توګه کار وکړي. د دوی د انټي اکسیډنټ ملکیتونو له لارې، سوپر اکسایډ ډیسموټیس (SOD) او پیرو آکسیډیس (POD) د دفاعي غبرګونونو پیل کولو کې مرسته کوي، چې SOD د دفاع لومړۍ کرښه ده.33په وریجو کې، د نباتاتو پیرو آکسیډیز فعالیت د نباتاتو د ناروغیو لکه *پیریکولیریا اوریزا* او *زانتوموناس اوریزا pv. اوریزا* سره د انتان وروسته رامینځته کیږي.32په دې څیړنه کې، د وریجو په مستعمره شویو او/یا د *Magnaporthe oryzae* NP19 سره واکسین شوي وریجو کې د پیرو آکسایډ فعالیت زیات شوی؛ په هرصورت، *Magnaporthe oryzae* د پیرو آکسایډ فعالیت اغیزه نه ده کړې. سوپر اکسایډ ډیسموټیز (SOD)، د H₂O₂ ترکیب په توګه، د O₂⁻ H₂O₂ ته کمولو ته هڅوي. SOD د نبات دننه د H₂O₂ غلظت متوازن کولو سره د مختلفو فشارونو په وړاندې د نباتاتو مقاومت کې مهم رول لوبوي، په دې توګه د نبات زغم د مختلفو فشارونو په وړاندې لوړوي³⁴. پدې څیړنه کې، د لوښي په تجربه کې، د *Magnaporthe oryzae* واکسین کولو (30 DAT) څخه 30 ورځې وروسته، د RF او RBF ګروپونو کې د SOD فعالیتونه په ترتیب سره د R ګروپ په پرتله 121.9٪ او 104.5٪ لوړ وو، چې د *Magnaporthe oryzae* انتان ته د SOD غبرګون ښیې. په دواړو لوښو او ساحوي تجربو کې، د *Magnaporthe oryzae* NP19- واکسین شویو وریجو کې د SOD فعالیتونه په ترتیب سره د واکسین کولو څخه 30 ورځې وروسته د غیر واکسین شویو وریجو په پرتله 67.7٪ او 28.8٪ لوړ وو. د نباتاتو بایو کیمیکل غبرګونونه د چاپیریال، د فشار سرچینې، او د نبات ډول لخوا اغیزمن کیږي³⁵. د نباتاتو انټي اکسیډنټ انزایم فعالیتونه په مستقیم ډول د چاپیریالي عواملو لخوا اغیزمن کیږي، کوم چې په پایله کې د نبات د مایکروبیل ټولنې بدلولو سره د نبات انټي اکسیډنټ انزایم فعالیتونه اغیزمن کوي.
د وریجو د بلاسټ ناروغۍ فنګس (کوساکونیا اوریزیفیلا NP19، NCBI د لاسرسي شمیره PP861312) چې پدې څیړنه کې کارول شوی و، سټرین وو13د تایلینډ په ناخون فانوم ولایت کې د وریجو د RD6 د ریښو څخه جلا شوی (16° 59′ 42.9″ N 104° 22′ 17.9″ E). دا نوعه د مغذي شوروا (NB) کې د 30°C او 150 rpm په تودوخه کې د 18 ساعتونو لپاره کرل شوې وه. د باکتریا غلظت محاسبه کولو لپاره، د باکتریا تعلیق جذب په 600 nm کې اندازه شو. د باکتریا تعلیق غلظت د۱۰⁶CFU/mL د تعقیم شوي ډیونیز شوي اوبو سره (د). د وریجو بلاسټ فنګس (Pyricularia oryzae) د کچالو ډیکسټروز اګر (PDA) باندې په ځای ډول واکسین شوی و او د 7 ورځو لپاره په 25 درجو سانتی ګراد کې اچول شوی و. فنګسي مایسیلیم د وریجو سبس اګر منځني (2٪ (w/v) د وریجو سبس، 0.5٪ (w/v) سوکروز، او 2٪ (w/v) اګر په ډیایون شوي اوبو کې منحل شوي، pH 7) ته لیږدول شوی و او د 7 ورځو لپاره په 25 درجو سانتی ګراد کې اچول شوی و. د حساس وریجو کښت (KDML105) یوه تعقیم شوې پاڼه د کونیډیا هڅولو لپاره په مایسیلیم کې کیښودل شوه او د ګډ UV او سپینې رڼا لاندې د 5 ورځو لپاره په 25 درجو سانتی ګراد کې اچول شوې وه. کونیډیا د 10 ملی لیتر تعقیم شوي 0.025٪ (v/v) ټوین 20 محلول سره د مایسیلیم او اخته شوي پاڼو سطح په نرمۍ سره پاکولو سره راټول شوي. د فنګسي محلول د پنیر د اتو طبقو له لارې فلټر شو ترڅو مایسیلیم، اګر او د وریجو پاڼې لرې شي. د نورو تحلیلونو لپاره په تعلیق کې د کونیډیا غلظت 5 × 10⁵ کونیډیا/ملی لیتر ته تنظیم شو.
د کوساکونیا اوریزیفیلا NP19 حجرو تازه کلچرونه د NB میډیم کې د 37 درجو سانتی ګراد په تودوخه کې د 24 ساعتونو لپاره د کښت کولو له لارې چمتو شوي. د سینټرفیوګیشن (3047 × g، 10 دقیقې) وروسته، د حجرو ګولۍ راټوله شوه، دوه ځله د 10 mM فاسفیټ بفر شوي مالګین (PBS، pH 7.2) سره مینځل شوه، او په ورته بفر کې بیا ځړول شوه. د حجرو تعلیق نظری کثافت په 600 nm کې اندازه شو، چې نږدې 1.0 ارزښت ترلاسه کړ (د 1.0 × 10⁷ CFU/μl سره مساوي چې د مغذي موادو اګر پلیټونو باندې د پلیټ کولو لخوا ټاکل کیږي). د P. oryzae کونیډیا د PBS محلول کې د ځنډولو او د هیموسیټومیټر په کارولو سره د شمیرلو له لارې ترلاسه شو. د *K. oryziphila* NP19 او *P تعلیقونه. د پاڼو د سمیر تجربو لپاره، K. oryziphila* conidia په تازه وریجو پاڼو کې په ترتیب سره د 1.0 × 10⁷ CFU/μL او 5.0 × 10² conidia/μL غلظت کې چمتو شوي. د وریجو نمونې چمتو کولو طریقه په لاندې ډول وه: د وریجو د تخمونو څخه 5 سانتي متره اوږدې پاڼې پرې شوې او د پیټري لوښو کې ځای پرځای شوې چې د لندبل جذبونکي کاغذ سره پوښل شوي. د درملنې پنځه ډلې رامینځته شوې: (i) R: د وریجو پاڼې د کنټرول په توګه د باکتریا واکسین پرته، د 0.025٪ (v/v) سره ضمیمه شوي د 20 محلول ترمنځ؛ (ii) RB + F: وریجې د K. oryziphila NP19 سره واکسین شوي، د فنګس د 2 μL کونیډیا تعلیق سره ضمیمه شوي چې د وریجو چاودنه رامینځته کوي؛ (iii) R + BF: په R ګروپ کې وریجې د بلاسټ فنګس کونیډیا تعلیق او K. oryziphila NP19 (د حجم تناسب 1:1) مخلوط 4 μl سره ضمیمه شوي؛ (iv) R + F: په ګروپ R کې وریجې د 2 μl بلاسټ فنګسي کونیډیا تعلیق سره ضمیمه شوې؛ (v) RF + B: په ګروپ R کې وریجې د 2 μl بلاسټ فنګسي کونیډیا تعلیق سره ضمیمه شوې د 30 ساعتونو لپاره انکیوبیټ شوې، او بیا د K. oryziphila NP19 2 μl په ورته ځای کې اضافه شوې. ټول پیټري لوښي د 30 ساعتونو لپاره په تیاره کې په 25 درجو سانتي ګراد کې انکیوبیټ شوي او بیا د دوامداره رڼا لاندې ځای په ځای شوي. هر ګروپ په درې اړخیزه توګه جوړ شو. د 72 ساعتونو کلتور وروسته، د نباتاتو نسجونه د الکترون مایکروسکوپي (SEM) سکین کولو سره مشاهده او تحلیل شول. په لنډه توګه، د نباتاتو نسجونه د فاسفیټ بفر کې تنظیم شوي چې 2.5٪ (v/v) ګلوټارالډیهایډ لري او د ایتانول محلولونو لړۍ له لارې ډیهایډریټ شوي. د کاربن ډای اکسایډ سره د مهم نقطې وچولو وروسته، نمونې د سرو زرو سره پوښل شوي او په پای کې د سکین کولو الکترون مایکروسکوپ په کارولو سره معاینه شوي.15
د پوسټ وخت: دسمبر-۱۵-۲۰۲۵